Informe de antimicrobianos
Enviado por Juan Guzmán • 4 de Enero de 2023 • Informes • 2.498 Palabras (10 Páginas) • 72 Visitas
UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA[pic 1][pic 2]
Facultad ciencias de la salud
Programa de Bacteriología
INFORME DE LABORATORIO
GUIA #6 – CONTROL DE MICROORGANISMOS: PRUEBAS DE SENSIBILIDAD A LOS ANTIMICROBIANOS Y VALORACIÓN DE DESINFECTANTES
JUAN ENRIQUE GUZMÁN MARTÍNEZ
KEREN SOFIA PACHECO VERTEL
NATALIA ISABEL VEGA SANCHEZ
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD, UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
504114: INTRODUCCIÓN A LA MICROBIOLOGÍA
GRUPO: L-1
DOCENTE: DRA. LISSY GRACIA HERRERA
DE JUNIO DEL 2022
INTRODUCCIÓN
Existen diversos tipos de microorganismos, los cuales son una de las principales causas de las enfermedades en el ser humano, es por ello, que el hombre se encuentra constantemente en la búsqueda de cómo contrarrestarlas. No obstante, el manejo clínico de las enfermedades infecciosas, si se trata específicamente de origen bacteriano, son controladas con una gran variedad de agentes antimicrobianos, de los cuales se deben seleccionar aquellos que tengan buena penetración, baja toxicidad, pero que sean activos frente al agente causal.
Por lo tanto, es necesario que los procedimientos en el laboratorio para el estudio de la sensibilidad de los microorganismos sean confiables. Dentro de estos métodos, uno de los más utilizados es el antibiograma, siendo esta una técnica descrita por Kirby Bauer, convertida hoy en día en la forma más común, rápida y práctica para determinar la sensibilidad o resistencia a un antibiótico, que se realiza en los laboratorios, proporcionando información, que permite determinar el antibiótico específico para darle un tratamiento adecuado a la enfermedad (Maye,B 1984). Asimismo, estos microorganismos no solo se encuentran en nuestro organismo, sino que también pueden encontrarse en el ambiente, representando un riesgo para nuestra salud, de tal modo que, es necesario emplear sustancias químicas conocidas como desinfectantes, que ayudan a destruir estos microorganismos y evitar que se proliferen.
Por consiguiente, en este informe se empleará el método de Kirby Bauer para determinar la sensibilidad de un microorganismo frente a un antimicrobiano, con el fin de conocer su fundamento para evitar potenciales errores. A su vez, se realizará una evaluación a los desinfectantes de uso general en el laboratorio, mediante métodos cualitativos.
MARCO TEÓRICO
Los desinfectantes hacen parte de los principales mecanismos de prevención de enfermedades ya que estas sustancias actúan eliminando microorganismos como las bacterias, virus o hongos; Los desinfectantes existen hoy en una gran variedad de tipos y modelos y si nos atenemos a la definición de desinfectante como un producto o elemento que limpia una superficie o espacio y evita la presencia de suciedad, bacterias o virus, muchos productos de uso común pueden entrar dentro de este grupo: jabones, cloros, detergentes, aerosoles, limpiadores para pisos o vidrios, ceras, etc. Todos estos productos tienen el objetivo principal de dejar la superficie o espacio limpio y seguro. Aun así, no siempre podemos contar con la certeza de estar en ambientes libres de microorganismos que son perjudiciales para las personas y por tanto se pueden producir enfermedades que afectan gravemente la salud humana. Debido a esto, se hace necesario el consumo de medicamentos que pueden actuar en contra del agente patógeno ya sea produciendo su muerte o interrumpiendo su multiplicación, para así poder detener el desarrollo de una infección.
Se denomina antibiótico a la sustancia que tiene la capacidad de eliminar o de interrumpir el crecimiento y la proliferación de diversos microorganismos patógenos. Esto se debe a que los antibióticos pueden actuar como bactericidas o desarrollar una acción bacteriostática. El fenómeno conocido como resistencia bacteriana tiene lugar cuando las bacterias se vuelven resistentes a ciertos antibióticos, de manera que éstos no consiguen matarlas o impedir que continúen creciendo.
El antibiograma es una prueba que determina la susceptibilidad de un microorganismo frente a los medicamentos antimicrobianos, a partir de la exposición de una concentración estandarizada del germen a estos fármacos. Esta prueba tiene métodos que pueden ser cualitativos o semicuantitativos. El método de difusión en disco más comúnmente usado (también conocido como prueba de Kirby-Bauer) es adecuado para los microorganismos de crecimiento rápido. Se basa en la colocación de discos impregnados con antibióticos en placas de agar inoculadas con el microorganismo que está probándose. Después de la incubación (por lo general de 16 a 18 h), se mide el diámetro de la zona de inhibición que rodea a cada disco. Cada combinación de microorganismo-antibiótico tiene diámetros diferentes que implican que es Sensible (S), Intermedio(I) o resistente (R).
OBJETIVOS
- Determinar el grado de susceptibilidad de un microorganismo frente a un antimicrobiano mediante el método de Kirby Bauer
- Conocer el fundamento del antibiograma e identificar principales fuentes de error en la valoración in vitro de antibióticos
- Valorar desinfectantes de uso general en el laboratorio de microbiología mediante métodos microbiológicos cualitativos
PROCEDIMIENTOS
- PRUEBAS DE SENSIBILIDAD A LOS ANTIMICROBIANOS
Prueba de sensibilidad de Escherichia coli por difusión en agar con discos (método Kirby Bauer):
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- VALORACIÓN DE DESINFECTANTES
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RESULTADOS Y ANÁLISIS
- PRUEBAS DE SENSIBILIDAD A LOS ANTIMICROBIANOS
Prueba de sensibilidad de Escherichia coli por difusión en Agar con discos (método Kirby Bauer):
Resultado de antibiograma por método de difusión en Agar Müller Hinton |
[pic 5][pic 6][pic 7][pic 8][pic 9][pic 10][pic 11] A: Nitrofurantoina B: Cefaclor C: Cefazolina D: Ceftriaxona E: Ciprofloxacino F: Amikacina |
Antibiótico | Abreviación | Medida del halo | Sensible | Resistente | Análisis |
Nitrofurantoina | F 300 | 18 mm | Si | No | Posterior a la realización de la medición del halo de inhibición de este antibiótico sobre la bacteria, se comparó la medida obtenida con el parámetro dictado por el CLSI para la determinación de la sensibilidad o resistencia de la E. coli ante la Nitrofurantoina; y se concluyó que la bacteria es sensible, puesto que la medida necesaria para determinar la resistencia ante dicho antibiótico debe ser menor o igual a 17 mm; la acción que tiene este antibiótico perteneciente a la familia de los antibacterianos nitrofuranos es sobre los procesos enzimáticos de respiración celular, el metabolismo glucídico, la síntesis de proteínas y por su puesto la formación de la pared celular bacteriana. En general, la acción antibacteriana de la nitrofurantoina es bacteriostática; pero también puede llegar a ser bactericida sobre determinados microorganismos cuando hay altas concentraciones. |
Cefazolina | KZ 30 | 16 mm | El parámetro para la determinación de la sensibilidad ante este antibiótico dictado por el CLSI dice que la medición del halo de inhibición deber mayor o igual a 15mm, por lo que se interpreta que la E. coli es sensible ante la cefazolina; la susceptibilidad de esta bacteria es debida a que este antimicrobiano, que es una cefalosporina de primera generación, se fija en las proteínas fijadoras de penicilina (PBP) presentes en el exterior de la membrana celular de la bacteria; interrumpiendo el tercer y último paso de la síntesis de un elemento obligado, la pared celular. La cefazolina inhibe la síntesis del peptidoglicano, produciendo la lisis y muerte bacteriana; teniendo en cuenta esto último, se puede deducir que este antibiótico es de tipo bactericida. | ||
Ceftriaxona | CRO 30 | 29 mm | Si | No | Al realizar la medición del halo de inhibición, este contenía un diámetro de 24mm, por lo tanto, es posible interpretar que la bacteria E.Coli, a la cual se le practicó el antibiograma es sensible al antibiótico ceftriaxona, ya que al comparar este valor con los parámetros establecidos por el CLSI, cumple con los requisitos para clasificar a un microorganismo Gram negativo(enterobacteria) como sensible a este tipo de antibiótico. Esta bacteria aerobia Gram negativa, es susceptible por la acción de esta cefalosporina, porque inhibe la síntesis de la pared celular, es decir, bloquea la formación del componente principal de este organelo, el peptidoglicano. Esto lo realiza, a partir de su unión a las proteínas fijadoras de penicilinas (PBP), impidiendo que se produzcan las reacciones de transpeptidación. En consecuencia, inactiva el inhibidor de las enzimas autolíticas, sin embargo, activa las enzimas líticas, dando como resultado la destrucción de la bacteria. Por último, impide que se siga dando la división bacteriana. |
Ciprofloxacino | CIP 5 | 32 mm | Si | No | Se obtuvo como resultado de la medición del halo, que la bacteria E. Coli es sensible al antibiótico ciprofloxacino, ya que la medida del diámetro fue de 32 mm, por lo tanto, al comparar este valor con el establecido por el CLSI (mayor o igual a 21mm), es posible determinar su alta susceptibilidad. Este agente antimicrobiano, es de la clase fluoroquinolonas, los cuales actúan inhibiendo la topoisomerasa IV (enzima encargada de separar los cromosomas hijos, luego de la replicación) y la DNA-girasa en la bacteria (enzima que rompe las cadenas de cromosomas y finalizada la formación de la superhélice, las une), trayendo como consecuencia que no se logre realizar la replicación y transcripción en el ADN bacteriano. A su vez, es importante destacar, que, aunque en el ADN de los seres humanos se encuentren ciertos tipos de topoisomerasas, algo parecidas al de estas bacterias, no se ven afectadas por las concentraciones bactericidas de este antibiótico. |
Amikacina | AK 30 | 18 mm | Si | No | La medición del diámetro del halo de inhibición en el caso del disco con antibiótico Amikacina, se obtuvo que este fue de 18 mm, posteriormente se comparó con los parámetros del CLSI, de tal modo que, fue posible determinar a la bacteria E.Coli como sensible a este tipo de antimicrobianos( sensible si es mayor o igual a 17 mm). Este antibiótico, es de la clase aminoglucósidos, los cuales tienen la capacidad de actuar sobre los ribosomas, modificando el código genético e impidiendo que se una a este organelo el ARNm, por lo tanto, no se podrá realizar en la bacteria la síntesis proteica. No obstante, las enterobacterias son un grupo amplio de microorganismos que son susceptibles al antibiótico Amikacina, como en el caso de la E.Coli. |
Cefaclor | CEC 30 | 6 mm | No | Si | Al realizar la lectura de la placa 24 horas del tiempo de aerobiosis, se observó crecimiento bacteriano alrededor del sensidisco con el antibiótico cefaclor; es decir, no se un formó halo de inhibición. La medida que se tomó, que fue igual 6mm, correspondía a el diámetro del sensidisco; esto ya daba una idea de que el microorganismo al que se realizó la prueba podría ser resistente ante este antibiótico, sin embargo, se corroboró con los parámetros dictados por el CLSI para la determinación de la resistencia o sensibilidad ante este antibiótico; lo cual nos plantea que la bacteria es resistente, si el halo de inhibición es mayor o igual a 18mm; mediante esto, se confirmó que la bacteria Escherichia coli es resistente a la acción del cefaclor. Este antibiotico pertenece al grupo de las cefaloporinas de segunda generación; la resistencia de la E. coli bacteria ante dicho antimicrobiano puede ser a causa de diversos mecanismos de resistencia, los cuales pueden deberse a la incapacidad del antibiótico para llegar al sitio donde ejerce su acción; o por cambios que sufren las proteínas fijadoras de penicilina(PBPs) que son blancos de cefalosporinas (enzimas que bloquean el accionar del antibiótico) lo que deriva en la disminución de la afinidad del antibiótico a dichas proteínas o incluso el impedimento de ligarse a estas. Otra posible razón de la resistencia pudo ser la producción betalactamasas tipo I, las cuales producen la hidrolisis del anillo betalactámico presente en la estructura del cefaclor, lo que se traduce en que inhiben la acción del antibiótico hacia la bacteria. La producción de estas enzimas inactivantes hace parte de los mecanismos más comunes de resistencia bacteriana ante los antimicrobianos. |
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