LABORATORIO DE BIOQUIMICA PRACTICA Nª 1 PROPIEDADES FISICAS Y QUIMICAS DE LOS AMINOACIDOS

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA

LABORATORIO DE BIOQUIMICA

PRACTICA Nª 1

PROPIEDADES FISICAS Y QUIMICAS DE LOS AMINOACIDOS

OBJETIVOS:

• Observar algunas  propiedades físicas de los aminoácidos.
• Reconocer la presencia de aminoácidos por la  reacción de estos con  la Ninhidrina
• Identificar algunos grupos funcionales presentes en aminoácidos específicos  mediante la formación de productos coloreados.

TEORIA RELACIONADA

Las células vivas producen macromoléculas que  son  biopolímeros constituidos por unidades monoméricas o bases estructurales. Para las proteínas, estas  unidades   son los L – α – aminoácidos.  Las propiedades biológicas de estas macromoléculas están determinadas en gran parte por las clases de aminoácidos presentes,  el orden en el que están dispuestos en una cadena de polipéptidos  y por lo tanto la relación espacial de un aminoácido con otro. Los aminoácidos  contienen grupos funcionales amino y carboxilo. En un α – aminoácido, ambos están unidos al mismo átomo (α)  de carbono. De los aminoácidos presentes  en la naturaleza, sólo 22 de ellos aparecen en las proteínas  de todas las formas de vida,  vegetal, animal o microbiana.  Los aminoácidos intervienen en la transmisión de impulsos en el sistema nervioso (Glicina y acido glutámico). Los aminoácidos esenciales deben ser suministrados en la alimentación, ya que nuestros cuerpos  no pueden sintetizarlos en cantidades adecuadas para respaldar el crecimiento (niños) o para conservar la salud (adultos).

Reacción de la Ninhidrina: Es un agente oxidante poderoso, reacciona con  todos los α aminoácidos a un pH entre 4 y 8 para dar un compuesto de color púrpura. Esta reacción se efectúa  también con los aminoácidos prolina e hidroxiprolina, pero en este caso se obtiene un color amarillo  en vez de púrpura  

Reacción Xantoproteica: Los aminoácidos que contienen un núcleo aromático forman nitroderivados de color amarillo cuando se calientan con ácido nítrico concentrado. Las sales de estos derivados son de color rojo naranja.

Reacción de Millon: Los compuestos que contienen el radical hidroxibenceno reaccionan con reactivo de millón formando compuestos rojos. Los únicos aminoácidos fenólicos son la  Tirosina  y  sus derivados y solamente ellos dan una reacción positiva. El reactivo original de Millon  es una solución de nitrato mercúrico en ácido nítrico 50% v/v.

Reacción del Acido Glioxílico para Triptófano: Grupo indólico del triptófano reacciona con ácido glioxílico en presencia del ácido sulfúrico concentrado dando un color púrpura.

Reacción de Sakaguchi: El único aminoácido que contiene grupos guanidinos es  la Arginina; esta reacciona con α naftol y un agente oxidante tal como agua de bromo  o hipoclorito  en un medio alcalino,  dando un color rojo.

MATERIALES Y REACTIVOS

        10 Tubos de ensayo

        1 Gradilla

        1 Pinza para tubos de ensayo.

        3 Pipetas de 1, 5 y 10 mls

        1 Gotero.

        1 Estufa

        1 Beaker de 500mls

        Papel indicador.

        Soluciones al 0.5% de aminoácidos: Glicina, Tirosina, Triptòfano, Fenilalanina, Arginina.

        Ninhidrina: Disolución al 0.2% en alcohol o acetona.

        HNO3 al 10%

        NaOH al 20% o amoniaco.

        Fenol, disolución al 0.1%

        Reactivo de Millón.

        Agua de bromo

        α- Naftol: 0.2%

        Nitrito de sodio.

        Acido glioxìlico

        Acido sulfúrico.                                                        

PROCEDIMIENTO:

1. Examen Físico: Anote el estado físico de la sustancia (Aminoácidos): Sólido, líquido, polvo, solución,  cristal. Si es homogénea.

Color: Ver si es uniforme o si cambia durante el proceso.

Olor: Percibir si se trata de olor característico o relacionado con un grupo químico.

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