Laboratorio de celulas cancerosas

Ejercicio #7: Morfología Células Cancerosas  

14 de enero de 2019

Resumen

En la realización del experimento, logramos ver, analizar e identificar entre las células normales y las células cancerosas.  Esto se realizó tiñendo una laminilla de dos pozos con células diferentes en cada uno. Para que esto fuera posible y efectivo de ver bajo un microscopio, se utilizaron diferentes tipos de soluciones y tintes en ambos pozos de las laminillas, cada uno con su propio tiempo de espera, tales como un amortiguador (5 min.), tinte azul de metileno (7 min.), tinte de eosina (30 seg.) y medio de montaje (el cual utilizamos agua). Al finalizar con esto, se colocó la laminilla bajo un microscopio y se pudieron identificar los tipos de células en cada pozo bajo cuatro magnitudes, las cuales fueron 4x, 10x, 40x y 100x.

Introducción

El cáncer es una de las enfermedades más maligna y abundante en el mundo. Muchos de nosotros hemos pasado por esta etapa de enfermedad ya sea en nosotros, en seres queridos o conocidos, en la cual unos podemos recuperarnos, pero otros lamentablemente fallecen. Ahora, en estos tiempos, existen maneras en las que un paciente con cáncer pueda tener una expectativa de vida diferente y duradera gracias a científicos o doctores que trabajan investigando sobre el desarrollo de esta terrible enfermedad.

En el ciclo celular y sus etapas que siguen las células por este para un buen crecimiento y multiplicación es muy importante ya que, si hay una anormalidad, esto puede causar las células cancerosas. Una célula normal tiene una muerte controlada. Esto sucede cuando en la célula hay daños en el ADN, estas activan su muerte ya proyectada. La mayoría de las células que se diferencian de organismos pluricelulares se quedan en la etapa G0 (mitosis) eternamente. Las células cancerosas tienen la capacidad de provocar la formación de vasos sanguíneos que les proveen oxígeno y nutrientes para su multiplicación. Estas no pueden entrar en la fase G0, por eso se dividen continuamente hasta llegar a una gran cantidad que forma tumores.

Para diferenciar las células normales de las cancerosas hay una característica más fácil de destacar y es por su multiplicación descontrolada en las células de cáncer. Estas también son afectadas por la inhibición de contacto. Mientras que las células normales al crecer y expandirse paran cuando tienen contacto con una célula vecina, las cancerosas no. Las mismas siguen creciendo, dividiéndose por encima de las demás creando las famosas masas que llamamos tumores y metástasis.

Materiales

• Laminilla lista para teñir
• Amortiguador
• Tinte azul de metileno
• Tinte eosina
• Agua
• Pipetas de transferencia
• Cubreobjetos
• “Beaker”
• “Kimwipes”
• Microscopio de luz

Procedimiento

1. Rotular microtúbulos como sigue: buffer rehidratación, azul de metileno, eosina y medio de montaje (en este caso era agua).
2. Despachar 500µl de cada solución al tubo correspondiente.
3. Echar agua destilada en un “beaker” de 250ml para enjuagar la laminilla.
4. Trabajar con la laminilla que contiene dos pozos con tipos de células diferentes.

1. Añadir 8 gotas de buffer de rehidratación a cada pozo de forma que cubra completamente a cada uno.
2. Incubar por 5 minutos a temperatura ambiente.
3. Aspirar el buffer utilizando la misma pipeta que se usó en la parte “a”.
4. Con pipeta fresca, añadir 8 gotas de azul de metileno a cada pozo. Incubar por 7 minutos a temperatura ambiente.
5. Aspirar el tinte usando la misma pipeta con la que se despachó.
6. Con pipeta fresca, añadir 8 gotas de eosina a cada pozo. Incubar por 30 segundos a temperatura ambiente.
7. Enjuagar laminilla sumergiendo en “beaker” con agua destilada. Remover exceso de agua en la laminilla dando golpes sobre el papel toalla.
8. Colocar cubreobjetos utilizando esmalte transparente (en este caso se utilizó agua).

1. Procedimiento para observación:

1. Localizar células en pozo #1 (próximo al área esmerilada) a 4x. Buscar área que tenga entre 15-20 células.
2. Describir la morfología general la forma y tamaño del núcleo (en relación con la célula) y la intensidad del color.
3.  Hacer dibujo o tomar foto.
4. Observar el mismo pozo a 4x, 10x, 40x y 100x haciendo observaciones como en el paso “b” y “c”.
5. Repetir los pasos “a-d” con las células del pozo #2.
6. Clasificar las células como normales o cancerosas.

Resultados

POZO #1: Células normales

 [pic 1] (4x)                                            [pic 2]  (10x)                       [pic 3] (40x)                                           [pic 4] (100x)

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