Practica pigmentos SEPARACIÓN DE PIGMENTOS VEGETALES EN EL LABORATORIO

SEPARACIÓN DE PIGMENTOS VEGETALES EN EL LABORATORIO

CAICEDO L., Leidy Diana; HERRERA C., Danna Jetseyn; PABÓN R., Luis Alberto

Unidades Tecnológicas de Santander. Laboratorio de Biología. Grupo A133

Tecnología en Recursos Ambientales. Bucaramanga. Colombia.

 e-mail: nanaj_0218@hotmail.com 

Octubre 01 de 2016

RESUMEN

Al iniciar a trabajar con el experimento teníamos como idea la observación, el análisis y la comprensión de que era un pigmento, en que lo podíamos encontrar  y como lo diferenciábamos. Cuando se observa la naturaleza, el color es una de las características que se destaca por la gran diversidad que presenta. En la naturaleza, el color cumple funciones importantes, entre ellas la capacidad fotosintética de los vegetales, ya que la principal molécula involucrada en la absorción de energía lumínica es la clorofila, uno de los pigmentos predominantes en la naturaleza.  El color de las plantas también influye sobre el potencial de una planta para reproducirse. En particular, el color de las flores atrae a los polinizadores que transportan el polen y facilitan la fecundación, mientras que la pigmentación de frutas y semillas atrae a los animales consumidores que luego dispersan las semillas y la especie hacia nuevos espacios.

Palabras claves: Pigmento, Cromatografía, Cloroplastos, Observación.   

ABSTRACT

When you start to work with the experiment had idea observation, analysis, and understanding that was a pigment, that we could find it and how differentiated it. When looking at nature, color is one of the features that stands out for the great diversity that presents. In nature, color fulfills important functions, including photosynthetic plant capacity, since the main molecule involved in the absorption of light energy is chlorophyll, one of the dominant pigments in nature. The color of the plants also influences the potential of a plant to reproduce. In particular, the color of flowers attract pollinators transporting pollen and facilitate the fertilization, while fruit pigmentation and seed attracts consumers animals which then disperse the seeds and the species into new spaces.

Key words: Pigment, Chromatography, Chloroplasts, Observation.

INTRODUCCIÓN

Para reconocer los pigmentos vegetales en el laboratorio por medio de la técnica  de cromatografía en papel se debe tener en cuenta una estructura donde, a través de una serie de pasos, se puede llegar a ver la forma en que se separan los pigmentos y gracias a esto, permite que se puedan identificar los pigmentos que se van a encontrar en el cromatograma. Ya que los pigmentos son insolubles en el agua, se debe realizar mediante un solvente orgánico, en este caso este procedimiento se realiza gracias a la acetona la cual hace una separación fina de los pigmentos, (este líquido es absorbido por el papel) y así poder finalmente observar en el los pigmentos según su grado de solubilidad. REFERENCIAS?

MATERIAL Y METODOLOGÍA

Material de laboratorio

• 1 mortero
• 1 embudo
• 1 caja de Petri
• 1 capilar
• 1 pipeta de plástico
• 1 Erlenmeyer (200 ml)
• Arena de cuarzo
• Papel filtro
• Tijeras

Material Biológico

• Hoja de espinaca fresca  

Reactivos

• Acetona
• Cloruro de Calcio
• Tetracloruro de Carbono (CCl4)

Equipos

• Extractor gases y humos

En el laboratorio se va a realizar la separación de pigmentos con las hojas de espinaca;  para llevar a cabo esto debemos tener en cuenta los pasos que debemos seguir para realizar el laboratorio:

1. Preparación del material: En este paso debemos tener en cuenta los materiales que vamos a utilizar:

• Lavar la hoja de espinaca.
• Cortar con las tijeras la vena de la hoja.
• Cortar la hoja (limbo) en trozos pequeños.
• Aplicar 5ml de acetona, menos de una cucharadita de arena de cuarzo y macerar.
• Al macerar se debe formar un caldo acuoso verde.

2. Preparación del papel filtro: (Para manejar el papel filtro debemos tener en cuenta que no lo debemos exponer a ningún tipo de grasa)

Primera parte:

• Abrir el papel filtro por la ranura que se indica.
• Se debe calcar la ‘Caja de Petri’ en el papel filtro. (queda en forma circular)
• Con las tijeras se corta el circulo y se marca la mitad (que queden 4 partes) de forma que se acomode al embudo este se dobla.

Con esto hecho se debe filtrar el caldo verde que se hizo anteriormente.

Segunda parte:

• En la otra parte del papel filtro recortar un rectángulo de 9cm por 5cm.
• A este rectángulo se le marca una línea a 1cm y se dobla a la mitad.

3. Filtración y siembra del caldo verde:

• Con el papel listo se acomoda en el Erlenmeyer  y se vierte el caldo para poder filtrarlo.
• Se adiciona cloruro de calcio a la muestra y se deja reposar aproximadamente 5 minutos.
• Después se vierte el líquido en la Caja de Petri y se comienza a hacer la siembra.
• Sobre la línea  de 1cm que se dibujó; con ayuda del capilar, se debe sembrar 4 veces el caldo.
• Se seca el papel filtro.
• Por ultimo en la Caja de Petri se adiciona 3ml de tetracloruro de carbono y se deja en el extractor de gases y humos y se coloca verticalmente de tal forma que el papel pueda absorber bien la sustancia.

RESUTADOS Y DISCUSION

[pic 1]        Figura 1.  Extractor de gases y humos

[pic 2]     [pic 3]             

Figura 2. Hojas de espinaca                                           Figura 3. Acetona

[pic 4]               [pic 5]

Figura 4. Corte de las hojas de espinaca,               Figura 5. Maceración.

5ml de acetona y arena de cuarzo.

[pic 6]                    [pic 7]

Figura 6. Dibujo de Caja de Petri en el                  Figura 7. Filtración del embudo

Papel filtro

[pic 8]               [pic 9]

Figura 8. Sustancia disuelta que                         Figura 9. Siembra de la muestra.

Posteriormente se lleva a sembrar.    

  (Figuras 1-9 Prácticas de extracción de pigmentos laboratorio de biología, UTS)

[pic 10]

Figura 10. Cromatograma (hecho en clase)

ANALISIS DEL CROMATOGRAMA?

El pigmento que más ocupó espació en los papeles filtro fue el caroteno, seguido por la xantofila, la clorofila-A y el que ocupó el más mínimo entre los tres fue la clorofila-B, ya que tiene la menor capacidad de solubilidad.

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Existen varios tipos de pigmentos vegetales que pueden ser encontrados en la clorofila de las células de estas. Cada una de ellas tiene contiene un color en específico y estás también absorben cierta cantidad que les da el color. Como en el caso de la xantofila, clorofila A, clorofila B y caroteno.

• Caroteno: El caroteno es el pigmento que da la coloración amarilla clara. Estos ceden la energía captada a la clorofila. Son moléculas de foto protección.

• La Xantofila: Es el pigmento que da la coloración amarillenta como en el caso de las hojas secas. Estas son compuestos que presentan características fotosintéticas y son más resistentes a la oxidación.

• Clorofila-A: La Clorofila-A es el pigmento que da la coloración verde intensa como en el caso de las plantas. Se encuentran en los cloroplastos y estas presentan características fotosintéticas.
• La Clorofila-B: es el pigmento que da la coloración verde que caracteriza a los plastos de las algas verdes y sus predecesores terrenales. Todos los organismos que contienen estos plastos son verdes.

                    [pic 11]

                Figura 11. Orden de separación de las bandas.

PREGUNTAS DE CONSULTA

Tabla 1. Ficha técnica de reactivos

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