PRÁCTICA(S): REACCIONES DE AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS. PRECIPITACIÓN, SEPARACIÓN Y PUNTO ISOELÉCTRICO DE PROTEÍNAS
Holdair AndradeEnsayo9 de Septiembre de 2017
1.356 Palabras (6 Páginas)641 Visitas
INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL [pic 1][pic 2]
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA
“DR. GUILLERMO CARVAJAL SANDOVAL”
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR
PROFESORA(S): MARÍA ELENA JUÁREZ CARVAJAL, VERONICA FARFÁN ALCÁNTARA, ROCÍO DEL CARMEN IBARRA GUZMÁN, SILVIA ELIZONDO JIMÉNEZ.
ALUMNOS: HOLDAIR ANDRADE CELIS, LUIS CARLOS ROMAN ESCOBEDO.
SECCIÓN: 1
EQUIPO:
PRÁCTICA(S): REACCIONES DE AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS. PRECIPITACIÓN, SEPARACIÓN Y PUNTO ISOELÉCTRICO DE PROTEÍNAS.
REACCIONES DE AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS
OBJETIVOS.
- Identificar la presencia de aminoácidos con grupos R específicos que constituyen a una proteína a través de reacciones coloridas.
- Conocer las propiedades de algunos aminoácidos y proteínas por medio de dichas reacciones de identificación.
RESULTADOS.
Reacción para grupos SH | Reacción de la Ninhidrina | Reacción de Hopkins-cole | Reacción de Millón | Reacción Xantoproteica | Reacción de Biuret | |
Gelatina | X | ✓ | X | ✓ | ✓ | ✓ |
Peptona |
X | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ |
Albumina | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ |
Aspartame | - | - | - | - | - | ✓ |
Tirosina | - | ✓ | - | ✓ | ✓ | X |
Triptofano | - | ✓ | ✓ | - | ✓ | X |
Fenilalanina | - | ✓ | X | X | X | X |
Cisteína | ✓ | - | - | - | - | - |
Agua | X | X | X | X | X | X |
Interpretación | La reacción de plomo para cisteína, es una reacción característica para los grupos sulfhídricos (SH). La presencia de estos grupos se detecta por la aparición de un precipitado negro/gris. El cual afirma la presencia de sulfuro. La prueba únicamente dio positiva con la cisteína y la albumina que fueron las soluciones que presentaron dicho precipitado. | Esta reacción identifica la presencia de grupos aminos libres de los aminoácidos. La prueba dio positiva con todas nuestras soluciones problema excepto el agua. El color de las soluciones cambio a un violeta indicando así que la prueba era positiva y esas soluciones tenían grupos aminos libres. | La reacción de Hopkins cole identifica la presencia del anillo indol y por consiguiente al triptófano por ser el único aminoácido con este grupo. La prueba dio positiva con peptona, albumina y obviamente triptófano. En las primeras dos se identifico la presencia de dicho aminoácido en su composición. La prueba es positiva cuando aparece un anillo violeta. | Esta reacción sirve para saber si existe tirosina en la solución. La aparición de un color rojo será una prueba positiva. Dicho color se presento con la gelatina, peptona, albumina y por su puesto la tirosina. | La reacción Xantoproteica identifica la presencia de grupos aromáticos activados en las soluciones. La prueba resulta positiva con la aparición de un color amarillo o naranja. Las soluciones problemas que presentaron grupos aromáticos fueron la albumina, gelatina, peptona, tirosina y triptófano. | Esta es una prueba general para proteínas y péptidos de cadena no menor a 3 unidades de aminoácidos ya que identifica la presencia de enlaces peptídicos en las soluciones. Nuestras soluciones que dieron positivo a esta prueba presentando un color violáceo, fueron gelatina, peptona, albumina y aspartame. |
Reacción de plomo para cisteína. [pic 3]
Cuando los aminoácidos y las proteínas que contienen grupos tiólicos se calientan en medio fuertemente alcalino, el azufre presente reacciona para formar sulfuros. Este sulfuro puede detectarse por la formación de un precipitado negro de sulfuro de plomo por adición de acetato de plomo. Los grupos tioles también reaccionan con el nitroprusiato de sodio en presencia de un exceso de amoníaco para dar un complejo de color rojo.
Reacción de la Ninhidrina.
La ninhidrina es un poderoso agente y reactivo común para visualizar las bandas de separación de aminoácidos por cromatografía o electroforesis, también es utilizada con fines cuantitativos para la determinación de aminoácidos.[pic 4]
Reacciona con todos los aminoácidos alfa cuyo pH se encuentra entre 4 y 8, dando una coloración que varía de azul a violeta intenso. Este producto colorido (llamado púrpura de Ruhemann) se estabiliza por resonancia, la coloración producida por la ninhidrina es independiente de la coloración original del aminoácido
Esta prueba es positiva tanto para proteínas como para aminoácidos. En aquellos casos donde no da positiva la prueba de biuret y da positiva la de ninhidrina, indica que no hay proteínas, pero si hay aminoácidos libres. La principal función de esta prueba es identificar grupos aminos libres.
Reacción de Hopkins-Cole.[pic 5]
La reacción de Hopkins-Cole, también conocida como reacción de Adamkiewiczs, es una prueba estándar para el triptófano y para las proteínas que contienen triptófano. La solución que se va a examinar se mezcla con ácido glioxílico y se agrega ácido sulfúrico concentrado. Un anillo entre violeta y rojo en la unión de los dos líquidos indica que la reacción es positiva.
...