Foro 2 Control Microbiano En Alimentos.

ESTIMACION DEL NUMERO MAS PROBABLE (NMP)

Estos métodos se basan en la presunción de que las bacteria se halla normalmente distribuidas en un medio líquido, esto es, que las muestra repetidas del mismo tamaño de un mismo producto, debe esperarse contengan el mismo número de gérmenes como promedio; naturalmente, algunas delas muestran pueden contener algunos gérmenes más o menos. La cifra promedio es el número más probable (Most probable number o MPN). Si el número de gérmenes es grande, la diferencia entre las muestras será pequeña; todos los resultados individuales serán próximos a la media. Si el número de gérmenes es pequeño, la diferencia entre las muestra será grande.

Si un líquido contiene 100 gérmenes por 100ml, cada muestra de 10ml debe contener 10 gérmenes como promedio. Algunas contendrán más, quizás menos, pero es poco probable encontrar muestras que no tengan gérmenes. Si se siembran en un medio conveniente diversas muestras tales, debe esperarse que haya crecimiento.

METODOS

1. METODO NORTEAMERICANO

TECNICA:

a) Preparar las muestras de alimentos y realizar las diluciones correspondiente

b) Pipetear 1 ml de cada dilución del homogenizado del alimento en tubos del caldo lauril sulfato triptosa, utilizando tres tubos por cada dilución.

c) Incubar los tubos a 35-37°C durante 24 y 48 horas.

d) Pasadas las primeras 24 horas, anotar los tubos que muestren producción de gas, volver a la estufa los tubos que hayan dado negativo durante 24 horas más.

e) Pasadas 48 horas, anotar los tubos que muestren presencia de gas.

f) Elegir la dilución más alta en la que sean positivos de formación de gas los tres tubos y las dos diluciones superiores más próximas. Por ejemplo, si la dilución más alta en la que aparecen los tres tubos positivos es la 1:100(10-2) y en la 1:1.000(10-3) hay un tubo positivo y en la 1:10.000(10-4) ninguna, el resultado se anotaría del siguiente modo :

10-2 = 3;

10-3 =1;

10-4 =0.

Y se revisa en las tablas a que NMP corresponde estos números.

Si no hubiera ninguna dilución que presentase los tres tubos positivos, seleccionar las 3 diluciones más altas, con algún tubo positivo. Por ejemplo, si las cuatro últimas diluciones con algún tipo tubo positivo fueran 1:10(10-1), 1:100(10-2); 1:1.000(10-3) y 1:10.000(10-4) con 2, 2, 1 y 1 tubo positivo, respectivamente los resultados se anotan:

10-2=2;

10-3=1;

10-4=1;

Cuando no se hayan hecho diluciones más altas, de forma que la última presente también los tres tubos positivos, seleccionar las tres últimas diluciones realizadas. Por ejemplo si las últimas tres diluciones realizadas fueran 1:100(10-2); 1:1.000(10-3); 1:10.000(10-4). Y el número de tubos positivos fuera 3, 3 y 3, respectivamente, los resultados se anotarían como:

10-2 =3;

10-3 =3;

10-4 =3;

g) Confirmar que los tubos de caldo lauril sulfato triptosa seleccionados en el paso f son positivos de organismos coliformes, transfiriendo un asa de cada tubo a otro tubo de caldo lactosa bilis (2%) verde brillante o sembrando por estrías en placas de agar oesina azul de metileno o de agar endo. incubar los tubos durante 24-48 horas a 35-37°C y observar l producción de gas. Observar los medios solidos de confirmación para ver si existen colonias tipias de coliformes después de 24-48 horas de incubación a 35-37°C. la formación en el agar oesina azul de metileno de colonias negras o con el

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