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A muchos les ha sucedido.


Enviado por   •  8 de Agosto de 2018  •  Apuntes  •  2.121 Palabras (9 Páginas)  •  9 Visitas

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Biotecnología Letters, Vol 19, no 3, marzo de 1997, págs. 237 – 240

Formación de subproductos en cultivo continuo de células recicladas de Lactobacillus casei

IK-Keun Yoo, Ho Nam Chang *, Eun Gyo Lee, Yong Keun Chang y Seung-Hyeon Moon1

Departamento de ingeniería química y centro de investigación en ingeniería de bioprocesos, Universidad KAIST, Taejon 305 – 701, Corea. 1Departamento de ciencias ambientales e ingeniería, Instituto Kwangju de ciencia y tecnología, Kwangju 506 – 303, Corea

Mientras que la productividad volumétrica del ácido láctico aumentó en la cultura continua de Lactobacillus casei con el reciclaje de la célula, la formación realzada de subproductos tales como acetato, formiato, etanol, y D-lactato fue observado en la fermentación célula-reciclada comparada con un chemostat simple en una gama similar de la tarifa de la dilución. El aumento de la formación de subproducto que fue significativamente dependiente de la limitación del sustrato resultó de una tasa de dilución más baja en lugar de una alta concentración de células en el fermentador de células recicladas.

base de 24 PTS min a base de palabras clave a la línea 1 de texto

Introducción

El ácido láctico es un material monómero posible para hacer el polímero biodegradable del ácido poliláctico (Datta et al., 1995). Aunque existen numerosos informes sobre la fermentación del ácido láctico, pocos grupos han considerado la producción de ácido láctico como monómero para la síntesis de polímeros. Las propiedades físicas de este polímero, como la cristalinidad y la biodegradación, se pueden ajustar manipulando el cociente isómero D/L del ácido láctico (Lipinsky y Sinclair, 1986). Ohara (1994) observó que la formación de subproducto que requiere el retiro durante paso de la purificación se debe reducir al mínimo en la produc-ción del ácido láctico monómero para el polímero del ácido poliláctico. La cultura continua con el reciclaje de la célula se ha estudiado extensivamente puesto que una alta densidad de célula puede proporcionar una productividad volumétrica mucho más alta en la fermentación ácida láctica (Ohleyer et al., 1985; Mehaia y Cheryan, 1987). Por otro lado, se observaron cambios en el equilibrio de los productos de fermentación durante el período de limitación de la glucosa en cultivos continuos con reciclo celular (Borch et al., 1991; Hjorleifsdottir et al., 1991; Major y Bull, 1989). Sin embargo, puesto que todos estos estudios fueron realizados con un LIMI-tation riguroso de la glucosa, el efecto de la concentración de la célula más bien que el efecto de la limitación del substrato en la formación del subproducto no fue determinado exactamente en el fermenter célula-reciclado. El objetivo de este estudio fue investigar si la alta concentración de células en la cultura reciclada por células afectaría la formación de subproductos en comparaciones con un chemostat sin reciclar células, ya que el


la calidad del producto, así como la productividad es de creciente interés.

Materiales y métodos

Microorganismo y preparación media

Lactobacillus casei  Ssp. rhamnosus  (ATCC 10863) fue

crecido en un medio que contiene (g/L): glucosa, 40 o 80;

Extracto de levadura, 15; acetato de sodio.3H2O, 1; K2Hpo4,

0.5; Kh2Po4, 0.5; MgSO4.7H2O, 0.2; MnSO4.H2O,

0.03; y FeSO4.7H2O, 0.03. Antiespumante (antiespumante

289, Sigma) fue agregado al medio en 0.1 ml/L.

Condiciones de fermentación

Las culturas fueron crecidas en una fermentadora del tarro (2.5 L: fermentadora de Corea Co., Corea) en 42 ° c. El pH fue mantenido en 6.0 por el NaOH de 10 M y el gas del nitrógeno era sparged en el fermentador. La agitación constante (200 rpm) se mantuvo durante el cultivo. Las células se volvieron a ciclar a través de un ultrafiltro de fibra hueca (corte M.W. de 100.000, Amicon H1P 100 – 43). La unidad de filtro de fibra hueca y las tuberías asociadas fueron esterilizadas mediante la circulación de un formaldehído de 0,3% y 200 ppm de mezcla de hipoclorito sódico durante la noche y se enjuagaron con agua estéril de 20 L antes de cada carrera de fermentación. El volumen de funcionamiento del sistema de fermentación fue principal-tained a 900 ml, consistente en aproximadamente 840 ml en el reactor y 60 ml en el bucle de reciclaje. La tasa de circo de cultivo a través del filtro fue de 1,5 L/min. Un sangrado del caldo fue retirado directamente del fer-mentar usando una bomba de peristáltica. Una bomba de alimentación se

© 1997 Chapman & Hall        Cartas biotecnológicas · Vol. 19 · No 3 · 1997        237


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se utiliza para suministrar el medio fresco a una tasa que se determinó a partir de la tasa de salida total menos la tasa de adición de una solución de 10 M NaOH.

Métodos analíticos

La concentración de la célula fue determinada ópticamente en 620 nanómetro y después calibrada en peso seco de la célula. La concentración de glucosa se midió enzimáticamente mediante el uso de los kits de glucosa-E (Youngdong Pharm. co., Corea). El ácido láctico total y el acetato fueron medidos por HPLC equipados con un detector de RI (Hitachi L-6000, Japón) usando una columna de intercambio iónico Aminex HPX-87H (Bio-Rad) a 50 ° c. El caudal fue de 0,6 ml/min y la fase móvil fue de 0.005 M H2Así4. Las concentraciones de acetato, D-lactato, formiato y etanol se determinaron mediante kits de pruebas enzimáticas estándar (Boehringer Mannheim, Alemania).

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