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Biología. Demostrar in vitro la actividad enzimática de los peroxisomas en diferentes células.


Enviado por   •  5 de Julio de 2016  •  Prácticas o problemas  •  1.305 Palabras (6 Páginas)  •  330 Visitas

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Objetivos

Demostrar in vitro la actividad enzimática de los peroxisomas en diferentes células.

Introducción

Todas las células posee metabolismo este es un proceso químico que se desarrolla en el interior del organismo o en alguna de sus pates. Comprende: el catabolismo que tiene como función desintegrar los compuestos orgánicos y liberar energía, el anabolismo cuya función es la elaboración de compuestos complejos a partir de compuestos más simples. El metabolismo de los seres vivos es muy parecidos.

El control del metabolismo es mantener las condiciones de vida óptima desarrollando mecanismos de defensa contra los agentes “desorganizadores”. El resultado de estas actividades de control se llama estado de equilibrio u homeostasis. Todos los seres vivos comparten el mismo modelo de homeostasis basado en los siguientes componentes: enzimas, genes y vitaminas. En todos los niveles de los seres vivos se hallan actividades que aumenta o disminuye la cantidad de enzimas. Pero los procesos de los eucariótico son aún muy desconocidos. Los mejores resultados se han obtenido con procarióticos. Este tipo de células es mucho más fácil de criar que las eucariotas, y se prestan más a los experimentos. Existen muchos niveles de regulación a nivel celular por ejemplo los orgánulos suelen tener múltiples actividades reguladoras.

Ejemplo de actividad de la enzima

MnO2 + H2O         2H2O + MnO2[pic 1]

Ensayo 1: Tomar 3 tubos y numerarlos de 1 al 3. Colocar en cada tubo 2ml de peróxido de hidrogeno. Luego en el tubo 1 colocar ½ cucharadita de hígado entero de pollo, en el tubo 2, colocar ½ cucharadita de hígado de pollo triturado y en el tubo 3, colocar 2g de Dióxido de manganeso. Pasado 5 minutos colocar en cada boca de tubo un fosforo encendido. Si el palillo encendido. Si el palillo encendido aumenta la intensidad la reacción es positiva.

Ensayo 2: Colectar, papas, apio e hígado, aproximadamente 100gr de cada uno y dividirlos equitativamente. La mitad de cada muestra ponerlos a cocer por un tiempo de 30 minutos.

Pasado este tiempo armar una batería de ensayo según los cuadros que siguen a continuación, en todos los casos ejecutar de la siguiente manera:

En un tubo de prueba poner 10gr. De muestra (papa, apio, hígado), agregar 5ml de peróxido de hidrógeno, homogenizar y luego tapar el tubo de prueba con el dedo pulgar cubierto con guantes de látex y agitar vigorosamente por 5min, pasado este tiempo colocarse en el lavandero y retirar cuidadosamente el dedo observar y anotar

RESULTADOS:

PRIMERA PRUEBA

Tubo

Papa cocida

H2O2

Observación

1

Machacada

5ml

No hay ninguna reacción

2

En trozos

5ml

No hay ninguna reacción

3

Machacada con 4gts de HNO3

5ml

Se quema pero en menor reacción

4

Machacada con 1ml de etanol

5ml

No hay ninguna reacción

5

Machacada con 4gts de H2SO4

5ml

Se quema o se vuelve negro

Tabla 1. Reacciones de la primera prueba, con papa cocida.                                          

SEGUNDA PRUEBA

Tubo

Apio cocido

H2O2

Observación

1

Machacada

5ml

No hay ninguna reacción

2

En trozos

5ml

No hay ninguna reacción

3

Machacada con 4gts de HNO3

5ml

Se quema pero en menor reacción

4

Machacada con 1ml de etanol

5ml

No hay ninguna reacción

5

Machacada con 4gts de H2SO4

5ml

Se quema o se vuelve negro

Tabla 2. Reacciones de la segunda prueba, con apio cocido.

TERCERA PRUEBA

Tubo

Hígado cocido

H2O2

Observación

1

Machacada

5ml

No hay ninguna reacción

2

En trozos

5ml

No hay ninguna reacción

3

Machacada con 4gts de HNO3

5ml

Se quema pero en menor reacción

4

Machacada con 1ml de etanol

5ml

No hay ninguna reacción

5

Machacada con 4gts de H2SO4

5ml

Se quema o se vuelve negro

Tabla 3. Reacciones de la tercera prueba, con hígado cocido.

CUARTA PRUEBA

Tubo

Papa cruda

H2O2

Observación

1

Machacada

5ml

Mayor liberación de gas O2

2

En trozos

5ml

Media liberación de gas O2

3

Machacada con 4gts de HNO3

5ml

Pequeña liberación de gas O2

4

Machacada con 1ml de etanol

5ml

Metabolizo el etanol y subió un poco más pero no se compara con las otras

5

Machacada con 4gts de H2SO4

5ml

Se quemó y libero poco gas

Tabla 4. Reacciones de la cuarta prueba, con papa cruda.

QUINTA PRUEBA

Tubo

Apio crudo

H2O2

Observación

1

Machacada

5ml

Mayor liberación de gas O2

2

En trozos

5ml

Media liberación de gas O2

3

Machacada con 4gts de HNO3

5ml

Pequeña liberación de gas O2

4

Machacada con 1ml de etanol

5ml

Metabolizo el etanol y subió un poco más pero no se compara con las otras

5

Machacada con 4gts de H2SO4

5ml

Se quemó y libero poco gas

Tabla 5. Reacciones de la quinta prueba, con apio crudo.

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