Bioquímica General Propiedades de los aminoácidos
berenice_lopezPráctica o problema24 de Noviembre de 2021
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[pic 1] | Universidad Anáhuac México Norte Facultad de Ciencias de la Salud Licenciatura en Biotecnología | ||
Asignatura | Bioquímica General | ||
Titulo | Propiedades de los aminoácidos | ||
Numero de Sesiones | 2 | Prac | |
Resultados de Aprendizaje | Que el alumno comprenda las propiedades de los aminoácidos y con ello pueda identificarlos experimentalmente. | ||
Objetivo |
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Material | MATERIAL
REACTIVOS:
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Metodología | Metodología
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Cuestionario | 1. ¿Qué importancia posee el grupo COOH y NH3+ en la determinación del pKa? 2. ¿Qué relación existe entre el comportamiento del pKa de los a.a. y una solución amortiguadora? 3. Escriba las reacciones de ionización de los siguientes a.a. en los siguientes pH: 1.3, 5.86, 8.6 y 10.96
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[pic 2] | Universidad Anáhuac México Norte Facultad de Ciencias de la Salud Licenciatura en Biotecnología | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Asignatura | Bioquímica General | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Titulo | Cuantificación de proteínas totales | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Numero de Sesiones | 2 | Prac | 3 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Resultados de Aprendizaje | Qué el alumno comprenda el fundamento y la técnica paran una correcta cuantificación de proteínas totales en un macroensayo. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
objetivo | Determinar la concentración de proteínas totales de diferentes muestras utilizando el método de Brandford. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Material | 1 Gradilla 10 Tubos de ensayo 1 Mortero con pistilo 2 Agitadores de vidrio 1 Propipeta 1 Pipeta de 5 ml. 4 Celdas para espectrofotómetro 1 Espectrofotómetro REACTIVOS Reactivo de Bradford Kit de concentraciones estándares de ϒ globulina bovina Agua destilada | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Metodología | Macro ensayo a 5 ml. 1. Enumere los tubos de ensaye de acuerdo a la siguiente tabla:
Si la muestra es líquida realizar una dilución 1:100 en agua y tomar las alícuotas correspondientes 0.05 y 0.10 ml; si la muestra es sólida agregar unas gotas de NaOH para facilitar su solubilidad. Una vez realizadas las diluciones medir en el espectrofotómetro a una longitud de onda de 595 nm; anotar las absorbancias y hacer los cálculos necesarios. Realizar las tablas y gráficas para la curva patrón tanto para el macroensayo y el microensayo, además de las diferentes muestras analizadas. Determinar la cantidad de proteínas de las muestras problema, mostrando los cálculos. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Cuestionario | 1.- Describa cómo funciona el espectrofotómetro. 2.- En qué condiciones se puede usar el macroensayo? 3.- ¿Cuál es la importancia del método de Bradford? 4.- Menciona 5 ejemplos en el que emplearías el método de Bradford. |
[pic 3] | Universidad Anáhuac México Norte Facultad de Ciencias de la Salud Licenciatura en Biotecnología | ||||||||||||||||||||||||||||||||
Asignatura | Bioquímica General | ||||||||||||||||||||||||||||||||
Titulo | MEDICIÓN DE CREATININA, UREA Y ÁC. ÚRICO | ||||||||||||||||||||||||||||||||
Numero de Sesiones | 2 | Prac. | |||||||||||||||||||||||||||||||
Resultados de Aprendizaje | Que el alumno obtenga habilidades para obtener mediciones bioquímicas utilizando técnicas colorimétricas | ||||||||||||||||||||||||||||||||
objetivo | Cuantificar urea, ác. Úrico y creatinina en una muestra de orina. | ||||||||||||||||||||||||||||||||
Material | 1 micropipeta por equipo de 10 μl 1 micropipeta por equipo de 1000 μl Puntas para micropipeta 4 vasos de precipitado de 100 ml 2 probetas de 50 ml 10 tubos de ensayo Baño maría Espectrofotómetro para lecturas de 600 ± 20 nm Agua destilada Muestra | ||||||||||||||||||||||||||||||||
Metodología | Cuantificación de uréa 1.- Diluir la muestra 1:50 con agua destilada 2.- Atemperar los reactivos (que alcancen la temperatura ambiente ) 3.- Agregar en cada tubo los reactivos como se muestran en el siguiente cuadro:
4.- Agitar bien e incubar por 10 min. a temperatura ambiente 5.- Leer la absorbancia A del patrón y de la muestra a 600nm. La coloración es estable por dos horas. 6.- Realizar los cálculos para obtener la concentración de urea en orina utilizando la siguiente fórmula: A muestra / A Patrón X C patrón X factor de dilución = C muestra Concentración del patrón: 50 mg/ dl Cuantificación de Creatinina: El método a emplear es colorimétrico, la creatinina presente en la muestra reacciona con el picrato en medio alcalino originando un complejo coloreado que se lee a una absorbancia de 500 nm. PROCEDIMIENTO 1.- Diluir la muestra 1:50 con agua destilada 2.- La reacción se debe llevar a cabo en la cubeta de acuerdo a la siguiente tabla
3.- Mezclar e inserte la muestra en el espectrfotómetro y poner el cronómetro en marcha. ... Disponible sólo en Clubensayos.com
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