Identificación y cuantificación de proteinas
Enviado por martin1204 • 25 de Octubre de 2015 • Prácticas o problemas • 1.099 Palabras (5 Páginas) • 429 Visitas
Universidad autónoma de ciudad Juárez
Programa de cirujano dentista
Martín Ulises salinas Aguilar 144436
Identificación y cuantificacion de proteinas
Horario: 1:00pm – 3:00pm
Laboratorio B
Introducción:
Las proteinas son moléculas formadas por cadenas lineales de aminoácidos.
Por sus propiedades físico-químicas, las proteínas se pueden clasificar en proteínas simples (holoproteidos), formadas solo por aminoácidos o sus derivados; proteínas conjugadas (heteroproteidos), formadas por aminoácidos acompañados de sustancias diversas, y proteínas derivadas, sustancias formadas por desnaturalización y desdoblamiento de las anteriores. Las proteínas son necesarias para la vida, sobre todo por su función plástica (constituyen el 80 % delprotoplasma deshidratado de toda célula), pero también por sus funciones biorreguladoras (forman parte de las enzimas) y de defensa (los anticuerpos son proteínas).
la variedad de las proteinas se debe a una serie de aspectos tales como: complejidad estructural, residuos aminoácidos que la forman, propiedades fisicas y quimicas de cada proteina en el organismo que la contiene.
Por lo tanto el analisis quimico de las proteinas en base a sus propiedades es muy amplio.
Ya que la identificación de proteinas es muy importante en el campo medico, clinico y para su investigación existen tecnicas mut utilizadas coneste objetivo.
En esta ocacion se considerara la reaccion xantoproteica, reaccion con ninhidrina, y reaccion de biuret.
En la reaccion xantoproteica afecta la integridad estructural de los residuos aminoácidos de las proteinas,. Es debido a la formación de un compuesto aromatico nitrado de color amarillo, cuando las proteinas son tratadas con acido nitrico concentrado, la prueba es especifica y da resultado positivo en aquellas proteinas con aminoácidos portadores de grupos bencenicos especialmente en presencia de tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un alcali vira a un color anaranjado oscuro (anillo por esterificacion)
Objetivo:
identificar proteinas por la presencia de enlaces peptidicos y grupos aromaticos y cuantificarla mediante la tecnica de biuret.
Metodo:
- 15 tubos de ensayo
- 1 gradilla
- 5 pipetas de 1.0mL
- pipetas pasteur
- 2 pipetas de 5.0mL
- 1 pipeta de 10.0mL
- 1bureta
Reaccion de ninhidrina los estandares utilizados para esta prueba seran, peptona gelatina, albumina y tirosina, tomar estandares en tubos limpios y etiquetados.
Colocar las cantidades indicadas de estos estandares y de ninhidrina en tubos por separado.
Después se dejan reposas las soluciones de cada tubo por 10 minutos para leer resultados.
Reaccion xantoproteica los estandares utilizados para esta prueba seran, peptona gelatina, albumina y tirosina, tomar estandares en tubos limpios y etiquetados.
Colocar las cantidades indicadas de estos estandares en tubos por separado.
Las soluciones anteriores se llevan a ebillicion por 5 minutos en baño maria previamente preparado en estufa.
Se deja raposar y enfriar por 10 minutos y se le agregan a todos los tubos algunas gotas de NH4OH por estratificación para observar los cambios de color y en algunos casos la formación de anillo de interfase.
Reaccion de biuret los estandares utilizados para esta prueba seran, peptona gelatina, albumina y tirosina, tomar estandares en tubos limpios y etiquetados.
Colocar las cantidades indicadas de estos estandares y de biuret en tubos por separado.
Resultados.
Se reportan los resultados de ninhidrina y xantoproteica y biuret como la descripción de los cambios de colores en las soluciones de la siguiente forma (++) color intenso, (+) cambio ligero y (-) sin cambio de color
Ninhidrina
Tubo | Estandar (ml) | Agua dest. ml | Ninhidrina mL | Resultado |
1 | 0.5 peptona | --- | 0.5 | ++ |
2 | 0.5 gelatina | --- | 0.5 | + |
3 | 0.5 albumina | --- | 0.5 | ++ |
4 | 0.5 tirosina | --- | 0.5 | + |
5(blanco) | --- | 0.5 | 0.5 | - |
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