Manual De Bacteriologia Basica

ESCUELA:

Centro de Estudios Tecnologicos industrial y de servicios No. 70

MATERIA:

Procesar Cultivos Bacteriológicos

FACILITADOR:

Lic. en Química Clínica: Rufino Hernández Pérez

ALUMNO:

María de los Angeles Izquierdo Juárez

SEMESTRE Y GRUPO:

4° Semestre Grupo “A”

ESPECIALIDAD:

Laboratorista Clínico

TEMA:

“Practicas de Cultivos Bacteriologicos”

INTRODUCCIÓN GENERAL

El hombre desde la antigüedad se ha planteado cuestiones tales como, ¿de qué está formado nuestro universo?, ¿cuál fue la primera forma de vida en la tierra desde su formación?, ¿Qué sucede dentro de nuestro organismo cuando nos enfermamos?, estas y muchas más preguntas han salido de las personas que razonan, que sienten la curiosidad de explicar tal y cual cosa. Es con este tipo de interrogantes que nació lo que conocemos como la Microbiología. Podemos definirla de acuerdo a sus raíces griegas (mikros=muy pequeño, bios= vida, logos=ciencia, estudio) como la ciencia que estudia a los seres vivos muy muy pequeños, tal es el caso de los virus, los parásitos, los hongos y principalmente las bacterias. Dicho esto anterior podemos afirmar, que de la microbiología se derivan ramas o sub-disciplinas. La microbiología como ciencia se ha venido desarrollando desde el siglo XIX, este retraso se debió además de la invención del microscopio por Anton van Leeuwenhoek a mediados del siglo XVII quien es considerado el fundador de la bacteriología, fue necesario idear nuevas técnicas básicas para estudiar los microorganismos.

Fueron alrededor de estos años, los primeros indicios hacia la bacteriología (parte de la microbiología que estudia a las bacterias) con los primeros trabajos de Robert Koch y Louis Pasteur que demostraron que enfermedades como el carbunco, la rabia, el cólera, la peste y la tuberculosis que azotaban en esos momentos a todo el mundo, eran producidas por microorganismos conocidos como bacterias. Comenzando así un obvio interés por los causantes de las enfermedades infecciosas.

Se cree que los primeros seres que aparecieron sobre la faz de la tierra fueron precisamente las bacterias que se alimentaban de las sustancias orgánicas que se producían constantemente en la atmósfera: eran quimioorganotrofos anaerobios, pues en ese momento no existía en el aire. Desde ese momento hasta su evolución posterior, hoy tenemos más información acerca de lo que son las bacterias.

Podemos definir a una bacteria como un organismo unicelular procarionte, es decir que carece de un núcleo definido. Entre sus características más importantes tenemos; presentan un tamaño de entre 0.5 y 5 µm, sus formas varían, pudiendo encontrarlas en forma de esferas, barras y hélices, pueden o no realizar la fotosíntesis, son capaces de vivir con o sin oxígeno, pueden moverse dentro del medio en el que se encuentren gracias a flagelos o pueden quedarse en un solo lugar, se les considera organismos ubicuos, por encontrarse en todos los lugares del planeta, y en el ecosistema son importantes degradadores de la materia muerta, y quizá su característica más grande es que pueden ser patógenas para los seres humanos e incluso para los animales.

Sabemos que las bacterias son demasiado pequeñas para verlas a simple vista, es aquí cuando entra la función de los medios de cultivo. El cual podemos definir como un conjunto de nutrientes que bajo determinadas condiciones ambientales permite el crecimiento y la proliferación de microorganismos como las bacterias.

En los cuales podemos inocular cualquier tipo de muestra problema, como esputo, orina, heces fecales, muestras vaginales, muestras provenientes de un exudado, liquido cefalorraquídeo, tejido de heridas, etc. Con el propósito de hacer crecer a las bacterias e identificar cual es la causante de una enfermedad infecciosa.

Esto es lo que hemos venido practicando a lo largo de estos 6 meses en la clase de “Procesar Cultivos Bacteriológicos”, misma impartida por el Licenciado en Química Clínica Rufino Hernández Pérez. Durante todo el semestre, no hizo nada más que explicarnos la función que cumple un medio de cultivo, las patologías que pueden ocasionar la gran variedad de bacterias existentes en el medio ambiente y también los síntomas que pueden haber cuando una bacteria es la responsable de una enfermedad, las medidas de seguridad que debemos de tener cuando estamos manejando muestras corporales problema, las cuales podrían afectarnos a nosotros mismos si no somos cuidadosos en su almacenamiento y disposición, como podemos decidir sobre cual medio de cultivo inocular una muestra, de acuerdo a su procedencia, pero sobre todo y lo más importante; aprendimos a sembrar en los diferentes medios de cultivo existentes y todo gracias a los dictados, las lluvias de ideas, las interrogaciones, las tareas pero sobre todo gracias a la experiencia que comunicada por nuestro facilitador.

En fin esto y más pudimos haber aprendido, lamentablemente dadas las precarias condiciones en las en las que se encuentran los laboratorios del CETis No. 70, no nos fue posible realizar todo lo que hubiéramos querido. Pero a pesar de todo esto, podemos afirmar que los objetivos iníciales del curso fueron cumplidos.

 Reglamento De Laboratorio 

1. El responsable de cada práctica de laboratorio es el maestro.

2. Es requisito indispensable para tener acceso a los laboratorios tanto para el maestro como para los alumnos el utilizar bata blanca, larga y de maga larga.

3. En ningún momento se permitirá la ingestión de bebidas o alimentos, ni fumar dentro del laboratorio.

4. Se hará responsable a todo el grupo o al equipo involucrado de cualquier descompostura de las instalaciones (gas, agua, mobiliario, etc.), que se produzca durante su permanencia en los laboratorios. El grupo o el equipo involucrado se encargará de reparar el desperfecto.

5. No se permitirá trabajar a los grupos de trabajo sin la presencia y supervisión del maestro.

6. Solo tendrán derecho a las prácticas de laboratorio todos los alumnos que estén regularizados y que aparezcan en las listas oficiales.

7. No se otorgara examen a los alumnos que adeuden material al laboratorio.

8. El material de laboratorio se entregará por equipo y el jefe de cada equipo lo recibirá y se hará responsable de dicho material.

9. Al finalizar la práctica el material ocupado deberá de ser entregado completamente limpio y seco al laboratorio.

10. Las mesas de trabajo de laboratorio, al término de la práctica deberán de quedar limpias y libres de basura.

11. Todo alumno deberá mantener el orden y la compostura correspondiente durante toda la práctica en el laboratorio.

PRACTICA No. 1

NOMBRE DE LA PRÁCTICA: “Preparación de Medios de Cultivo”

INTRODUCCIÓN

Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes que bajo determinadas condiciones ambientales permite el crecimiento y la proliferación de microorganismos como las bacterias. Su selección debe ser de acuerdo a las condiciones que requiere cada microorganismo para que puedan crecer adecuadamente. En un medio de cultivo no solo crecerá la bacteria que deseamos observar, sino también crecerán otras de las cuales no queremos saber, y esto podemos evitarlo empleando el medio de cultivo correcto. De acuerdo a su consistencia hay medios de cultivo en geles o caldos, o bien líquidos o semilíquidos. En esta práctica utilizaremos uno de los medios de cultivo más importantes gracias a su versatilidad y facilidad para trabajar.

OBJETIVOS

1. El alumno desarrollará con objetividad todos y cada uno de los pasos del procedimiento analítico para la preparación de los medios de cultivo.

2. El alumno justificará la importancia que tienen la preparación de los medios de cultivo en el asilamiento e identificación bacteriana.

MATERIAL Y EQUIPO

Balanza analítica ó balanza granataria.

Mechero Bunsen ó mechero Fisher.

Refrigerador.

Matraz Erlenmeyer de 500 ml.

Matraz Erlenmeyer de 100 ml.

Abate lenguas.

Guantes de látex desechables.

Hojas de papel bond tamaño carta.

Cajas de Petri sin división.

Cinta adhesiva.

Algodón.

Gasa de 10 x 10 cm sin esterilizar.

REACTIVOS

Medio de cultivo en polvo de base agar sangre.

Medio de cultivo en polvo para agar Mac Conkey.

Medio de cultivo en polvo para agar de sal y manitol.

Agua destilada.

METODOLOGÍA

Agar sangre

1. Suspender 40 gr. del polvo de base de agar sangre en 1 L de agua.

2. Mezclar perfectamente hasta la disolución.

3. Calentar la preparación anterior hasta la disolución completa del polvo, agitando y moviendo frecuentemente la mezcla; una vez disuelto todo el agar dejar hervir la mezcla por 1minuto.

4. Tapar el matraz Erlenmeyer con un tapón hecho de algodón y gasa.

5. Proceder a esterilizar en autoclave a 121° C por 15 minutos.

6. Sacar el matraz Erlenmeyer con el agar del autoclave y dejar atemperar.

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