PREINFORME BIOQUIMICA METABOLICA

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD

Escuela de Ciencias Agrícolas, Pecuarias y del Medio Ambiente-ECAPMA Programa: Agronomía

ACTIVIDAD INDIVIDUAL PREINFORME DE LABORATORIO

BIOQUIMICA METABOLICA

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA - UNAD ESCUELA DE CIENCIAS AGRARIAS PECUARIA Y DEL MEDIO AMBIENTE

PROGRAMA DE AGRONOMIA

CEAD PASTO

Octubre de 2014

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD

Escuela de Ciencias Agrícolas, Pecuarias y del Medio Ambiente-ECAPMA

Programa: Agronomía

PRACTICA N: 1 ACTIVIDAD UREÁSICA EN MUESTRAS DE ORIGEN BIOLÓGICO

INTRODUCCIÓN

La ureasa cataliza la hidrólisis de la urea a dióxido de carbono y amoniaco. Se encuentra principalmente en semillas, microorganismos e invertebrados. En las plantas, la ureasa es un hexámero consiste en seis cadenas idénticas y se encuentra en el citoplasma.

Diagrama conceptual

MATERIALES Y MÉTODOS

1.1. Materiales y equipos requeridos

Material / Equipo Características

Consiste en un pequeño tubo

cilíndrico de vidrio con una punta

abierta (que puede poseer una

Tubos de ensayo tapa) y la otra cerrada y

con gradilla redondeada, que se utiliza en los

laboratorios para contener

pequeñas muestras líquidas o

sólidas

Suelen ser de vidrio. Está

formada por un tubo transparente

que termina en una de sus puntas

de forma cónica, y tiene una

Pipetas 5 y 10ml graduación (una serie de marcas

grabadas) con la que se indican

distintos volúmenes. Permite

medir la alícuota de líquido con

bastante precisión.

Tubos cortos, graduados, de

diámetro interno uniforme,

prondiendo Del volumen, de

Bureta 25 ml décimas de mililitro o menos. Su

usoprincipalsedaen

volumetrías, debido a la

necesidad de medir con precisión

volúmenes de líquido variables.

Son pinzas específicas para

buretas. Poseen una sujeción

doble, en dos puntos próximos,

Pinzas para

impidiendo que la bureta se

bureta

doble, lo cual puede ocurrir si se

sujeta con una pinza de

laboratorio gruesa.

Se emplea para medir con

exactitud un volumen

determinado de líquido. La marca

Matraz aforado de graduación rodea todo el

100ml cuello de vidrio, por lo cual es

fácil determinar con precisión

cuándo el líquido llega hasta la

marca.

Se utiliza para mantener una

solución a una temperatura

Baño termostato

constante durante el tiempo que

nos interesa.

Recipiente de vidrio transparente

con forma cilíndrica y boca ancha,

Beaker 400 ml sirve para medir volumen de

líquidos y también para calentar y

mezclar sustancias.

soporte universal es una

herramienta que se utiliza en

Soporte laboratorio para realizar montajes

universal con los materiales presentes en el

laboratorio y obtener sistemas de

medición o de diversas funciones

Consiste en un frasco de vidrio

transparente de forma cónica, de

base ancha y alargada, cuello

Erlenmeyer 125

estrecho con labio reforzado, con

ml

una abertura en el extremo

estrecho, graduación esmaltada y

con un cuello cilíndrico.

Muestras Suelo, forraje y harina de

biológicas Concentrado

1.2 Reactivos a utilizar

Reactivo Formula Concentración

Ureasa al 0,1% EC3.5.1.5 pH= 7

en Buffer Fosfato

Urea (NH2)2CO 0,25M

Cloruro de HgCl2 1%

mercurio

Ácido clorhídrico HCl 0,1N

Indicador tashiro C15H14N3O2Na + C16H18N3SCl -

3H2O + C2H6O

1.3 Procedimiento

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1.3.1. En campo: Obtener muestras de origen biológico: Alimento Vegetal, (presentación harina), una muestra de forraje, una muestra de suelo previamente seco al aire, concentrado y leche cruda.

1.3.2 En Laboratorio

Extracción y solubilizarían de ureasa en harinas, suelos o forraje (método “salting out”)

Peso muestras: Wm; Extracción con NaCl 1%; Centrifugación; Filtración; medida sobrenadante: Vs; Titulación con HCl; Registro de mL gastados

2. TABLA DE DATOS

Tubos Tipo de Muestra mL gastados de HCL 0,

1N

B

St

1

2

3

4

Actividad Ureásica: Es el valor expresado al centésimo de unidad de pH en las condiciones del ensayo. Se mide en base a cambios de pH

Ureasa: es una enzima que cataliza la hidrólisis de urea a dióxido de carbono y amoníaco. La reacción ocurre de la siguiente manera: (NH2)2CO + H2O → CO2 + 2NH3

Hidrolisis: La hidrólisis es una reacción química del agua con una sustancia. Entre las sustancias que pueden sufrir esta reacción se encuentran numerosas sales, que al ser disueltas en agua, sus iones constituyentes se combinan con los iones hidronio u oxonio, H3O+ o bien con los iones hidroxilo, OH-, o ambos. Dichos iones proceden de la disociación o autoprotólisis del agua. Esto produce un desplazamiento del equilibrio de disociación del agua y como consecuencia se modifica el valor del pH.

BIBLIOGRAFIA

Granados, J. (2011) Modulo de Bioquímica Metabólica. Universidad Nacional Abierta y a Distancia.

Granados, J. (2011) Protocolo de Practicas Bioquímica Metabólica. Universidad Nacional Abierta y a Distancia

3. RESULTADOS ESPERADOS:

Según la guía de actividades se espera producir la hidrólisis de la urea por medio de la enzima amidohidrolosa denominada ureasa.

Cuantificar la actividad ureásica (AU) en muestras de origen biológico, mediante la técnica volumétrica de Berthelot.

GLOSARIO:

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Practica No. 2: CAPACIDAD AMORTIGUADORA (β) Y POTENCIAL AMORTIGUADOR (p (β ) DE

MUESTRAS BIOLÓGICAS

INTRODUCCIÓN

La capacidad amortiguadora, se utiliza para comparar las eficiencias de las soluciones amortiguadoras y se define como: La cantidad en miliequivalentes (meq) de ácido o base fuerte que puede neutralizar la solución amortiguadora, sufriendo un cambio de pH en una unidad. Matemáticamente, se expresa como la relación cociente entre el incremento de ácido o base fuerte con respecto al incremento del pH

Mentefacto o diagrama conceptual

MATERIALES Y MÉTODOS

1. Materiales y equipos requeridos

Material / Equipo Características

Potenciómetro

Consiste en un frasco de vidrio

transparente de forma cónica, de

base ancha y

...