Proyecto Elección y optimización de cepa nativa de La Mesa

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Elección y optimización de cepa nativa de La Mesa como productoras de proteasas neutras como aditivos de detergentes

¿Sabes cuál es la fórmula secreta de los detergentes para quitar las manchas? (DANI)

La respuesta es muy fácil ¡Enzimas! Más específicamente proteasas…

Las proteasas son las enzimas encargadas de romper los enlaces peptídicos de las proteínas, por lo que cuando hay alguna mancha de sangre, carne o huevo en la ropa ellas ayudan a romper la proteína y quitar la mancha.

Hay varios factores que influyen en la acción limpiadora, el primero es la temperatura, debido que a mayor temperatura la suciedad se disuelve más rápidamente y es más fácil formar las emulsiones necesarias para que el detergente actúe. Otro factor es el pH, para las enzimas usadas en los detergentes enzimáticos un pH cercano a 10,5 es el óptimo para su funcionamiento, sin embargo, la gran mayoría de los detergentes sintéticos tienen un pH neutro, afectando la eficacia de las enzimas en eliminar las manchas que en su mayoría son proteasas alcalinas.

¿Qué proponemos? (DANI)

La idea con este proyecto es buscar una proteasa microbiana neutra que pueda ser usada en la industria de los detergentes como una alternativa para mejorar la efectividad de las proteasas alcalinas usadas actualmente. Para esto, la enzima se obtendrá de diferentes bacterias productoras de proteasas extracelulares, que crezcan en ambientes de pH neutros. Cuando se elija el organismo, ser le hará una evolución dirigida mediante barajeo de ADN para mejorar la efectividad del productor como el de la enzima.

¿Cómo lo vamos hacer? (JUAN DIEGO)

1.  Recoger las muestras: (JUAN DIEGO)

Las muestras se harán en La Mesa, Cundinamarca en las rizósferas de las plantaciones de Mango. Se escogió este lugar debido al pH de su suelo está entre 7,6 y 8,6, los cuales son los pH indicados para encontrar cepas que produzcan proteasas que tengan un buen desempeño en ambientes neutros.

1. Aislamiento de cultivos y diferentes condiciones: (JUAN DIEGO)

Para el aislamiento buscaremos crecer cualquier organismo en el medio de cultivo LB, usando la metodología de Zhu et al, en 2013. La cual consiste en una serie de cultivos, incubaciones y centrifugaciones para poder usar los cultivos de producción en diferentes medios de cultivo, ajustando pH, temperatura y velocidad de rotación.

 Para cada uno de los organismos aislados se usarán diferentes tipos de medios con diferente cantidad de caseina (20g/L, 30g/L y 40 g/L), diferente velocidad de rotación (100, 150 y 200 rpm), diferente temperatura (37°C, 55°C y 60°C) y pH (7, 7,5 y 8). Para poder seleccionar entre todos los cultivos cuales son las especies productores de proteasas y cuál es la que tiene mayor eficacia en la producción.

…..  es mejor la caseina que el almidon

1. Efectividad del cultivo: (JUAN DIEGO)

Para poder escoger cual es el mejor organismo, se debe ver su efectividad para su propósito, por lo que también se harán pruebas para ver la cantidad de manchas proteicas en las fibras de la ropa. Para esto se usará de guía la metodología de García y Montoya (2017). En la cual se realiza la formulación de detergente con la proteasa y se hace un simulacro de lavado a un cuadro textil de 15x15cm. Para evaluar la efectividad, se pesa el cuadro textil antes de mancharlo, luego se mancha con la proteína (huevo, leche o sangre), se pesa nuevamente, se lava y se vuelve a pesar. La división entre el peso removido con el peso de la mancha de la proteína será la efectividad de la enzima.

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