Práctica de Cromatografía

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL[pic 1][pic 2]

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Químico Bacteriólogo y Parasitólogo

Integrantes:
Carrillo García Karina
Sánchez Patiño Ángel Diego

Equipo: 15

Práctica #6 Cromatografía

Química Orgánica

Grupo: 1QM1

Semestre: 1er

Nombre del Académico:
Adriana Gómez Macías
Dr. Alcives Ávila Sorrosa
Dr. Gonzalo Trujillo Chávez

Fecha de entrega: 2-noviembre-2015

Cromatografía

Objetivos

1.- Conocer la técnica de cromatografía y los factores experimentales que la afectan.

2.- aplicar y comparar los métodos cromatograficos de capa fina y columna, para separar, identificar y purificar compuestos orgánicos.

3.- Observar el efecto de diferentes fases móviles y estacionarias en la separación.

4.- Determinar los valores de Rf, como parámetro en la identificación de los compuestos separados.

Resultados.

Experiencia A: Cromatografía en placa fina.

Al realizar la experiencia con tres muestras de carotenos dispuestas equidistantemente a 0.5 cm del borde de la placa y utilizando como disolvente una mezcla de Hexano:Acetona 6:1 se obtuvieron 6 marcas de cada muestra, iguales entre sí, con las siguientes medidas.

Se realizo la misma operación, pero en esta ocasión se utilizaron aceites esenciales de clavo (Eugenol) y benceno como fase móvil, se obtuvieron tres marcas con las siguientes medidas:

Experiencia B: Cromatografía en Columna.[pic 3]

Posterior a la realización de la experiencia observamos que se obtienen dos fracciones diferentes, una con una tonalidad amarilla y una totalmente verde.

Esto debido a la separación de componentes con ayuda de los disolventes.

Análisis de resultados.

En la separación de carotenos utilizamos una mezcla de hexano:acetona 6:1, siendo esta una mezcla no polar, ya que el hexano no es polar, pero de igual manera se tiene una porción polar, por la cual podemos decir que el componente que fue arrastrado más fácilmente es una molécula no polar mientras que el componente menos arrastrado es una molécula mas polar, teniendo igualmente marcas ligeramente más polares que la parte no polar, por esta razón se forman seis marcas de componentes de los carotenos.

Igualmente en la separación de aceites esenciales obtuvimos tres marcas, utilizando el benceno como fase móvil, como ya sabemos el benceno es una molécula no polar, por lo cual los componentes arrastrados son no polares o poco polares, ya que un componente fue más arrastrado que los otros dos.

Para la cromatografía en columna obtuvimos dos fracciones, además de otras fracciones con menos color o con combinación de las dos fracciones, esto debido a que al comenzar a utilizar hexano como fase móvil arrastramos primero la fase no polar, que fue la fracción amarilla, posteriormente se utilizo una mezcla de hexano acetona, arrastrando por completo la fase no polar y comenzando a arrastrar la fase polar con la acetona, por esta razón.

Conclusiones.

Tras la realización de la práctica nos podemos dar cuenta de que a través de la cromatografía pudimos separar a los carotenos y los aceites esenciales en sus componentes, y de esta manera, a pesar de no haber obtenido los resultados obtenidos ya que las fracciones obtenidas a partir de la cromatografía en columna se encontraban muy diluidas, pudimos cumplir con los objetivos planteados en la práctica, siendo uno de estos el conocer la técnica de cromatografía y la comparación de las diversas técnicas de cromatografía.

Cuestionario

1.- Indicar qué precauciones se pueden tener al empacar una columna de cromatografía

Al agregar la suspensión de sílica-gel es una mezcla de hexano: acetato de etilo 1:1 hay que golpear ligeramente con los dedos para que el empacado sea uniforme. Mantener un goteo uniforme en la llave de salida del disolvente, pero hay que tener cuidado de no dejar la sílica-gel sin disolvente. Mantener siempre el nivel del eluyente 0.5cm por arriba del nivel del adsorbente. La columna se llena hasta tres cuartas partes de su capacidad

2.- Indicar qué fracciones se separaron por cromatografía en columna, de los extractos de espinaca, jitomate y cómo se identificaron.

De los jitomates obtuvimos licopenos, y de las espinacas: pigmentos, caroteno, clorofila ay clorofila b.; y mediante cromatografía en capa fina, obtuvimos la separación de sus componentes al pasar el disolvente por el punto aplicado, y por cromatografía en columna obtuvimos fracciones coloridas, las cuales indicaban el grado de separación

3.- Escriba ¿Qué conclusiones se obtienen de la cromatografía en capa fina y de la cromatografía en columna?

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