PRÁCTICA DE CROMATOGRAFÍA

1. Objetivo General

Calcular el factor de retardo (Rf) de cada componente presente en una mezcla de extracto de hojas de espinaca, mediante el proceso de cromatografía en papel filtro o de capa fina, disponible en un simulador, para la distinción de dichos componentes de la muestra.

1. Objetivos Específicos

1. Identificar el componente de mezcla que interactúa con mayor fuerza a la fase estacionaria mediante la relación existente entre la polaridad de los componentes y la polaridad del disolvente (fase móvil).

1. Aplicar la técnica de cromatografía en capa fina como criterio de identificación de sustancias.

1. Datos recopilados

Tabla 1. Datos de mezcla + disolvente

Tabla 2. Datos recopilados de distancias recorridas

1. Algoritmo de resolución

1. Mediante el siguiente enlace ingresar al simulador virtual para realizar la práctica de cromatografía:

1. Para realizar la cromatografía de una mezcla, se escoge como opción el extracto de hojas de espinaca.
2. Se escoge como disolvente al alcohol isopropílico + agua para ser colocado en la cámara cromatográfica con tapa.
3. Se procede a tomar un poco de la muestra de la mezcla con el capilar y se coloca en el punto P del papel filtro.
4. Abrir la cámara cromatográfica y coloque de manera suspendida el papel filtro dentro de ella.
5. Cierre la cámara cromatográfica y verifique que el disolvente no toque la línea de base.
6. A continuación, se empieza a ver la separación correspondiente, de manera que los componentes de la mezcla empiezan a subir junto con el disolvente (fase móvil).
7. Para que el proceso culmine y el disolvente llegue a su altura máxima se debe esperar 30 minutos.
8. Culminada la separación, se saca el papel filtro y dejar secar.
9. Una vez seleccionada la opción “mostrar escala”, aparecerá una regla permitiendo tomar las medidas respectivas de distancia de cada componente.
10. Dichas medidas servirán para calcular el factor de retardo (Rf) mediante la siguiente fórmula:

[pic 1]

1. Cálculos.

                                        [pic 2][pic 3]

[pic 4]

                                        [pic 5]

1. Resultados obtenidos

Tabla 3. Resultados del factor de retardo.

1. Análisis de resultados

Para llevar a cabo la siguiente práctica, se utilizó un simulador virtual que emula el funcionamiento de un proceso de cromatografía de capa fina. En este tipo de cromatografía, para lograr la separación de los componentes de la muestra, se utiliza una placa recubierta con fase estacionaria manteniendo un pequeño espesor constante a lo largo de la placa. El eluyente ascenderá por la placa y arrastrará los componentes a lo largo de ésta produciendo "manchas" de los componentes por capilaridad (fase móvil) (Walton, 2005).

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