Tp resueltos IBMC Fcen (UBA)

Matias Ian Popoff.

TP 0: Diluciones. 

-Un sistema homogéneo es aquel sistema material que presenta las mismas propiedades intensivas en cualquier  parte, ósea, está constituido por una única fase.

-Una propiedad intensiva es aquella que no depende de la cantidad de materia del cuerpo. Temperatura, densidad,  concentración, punto de fusión, punto de ebullición.

-Una propiedad extensiva es aquella que depende de la cantidad de materia, y su valor es proporcional al tamaño  del sistema que describe. Peso, volumen, longitud, energía potencial, calor.

-Una solución es un sistema homogéneo compuesto por dos o más componentes, un soluto que es generalmente  solido o liquido en menor cantidad, y un solvente el cual está en mayor proporción.

-Todas las reacciones químicas en un ser vivo ocurren en un medio acuoso. Esto depende de que todas las moléculas  de los reactivos se encuentren entre sí, que a su vez depende de la concentración de reactivos en dicha célula o  ambiente.  

-Un mol es un número fijo que corresponde al número de Avogadro, 6.02 x 1023.  

-Para caracterizar moléculas usamos una medida relativa que dice que tan pesada es aquella molécula considerando  al HIDROGENO. La MASA MOLECULAR RELATIVA del H2O por ejemplo es 18, ósea, es 18 veces más pesada que un  átomo de hidrogeno. Su unidad es UMA o Dalton.

-La MASA MOLAR (g/mol) corresponde en número a la MASA MOLECULAR RELATIVA pero NO SON LO MISMO.  Corresponde a la masa de la sustancia que corresponde a un mol de moléculas. Un mol de agua pesa 18 gramos, eso  quiere decir que un número de Avogadro de moléculas de agua PESA 18 GRAMOS y no que cada molécula pesa 18  gramos.  

Resolución. [pic 1]

Paso 1: 

-Escribir los datos que tenemos.

De solución diluida.

1500 ml. 

2 mM. 

Paso 2: 

De solución concentrada:  2M. 

-Cambio de unidades. 2 mM= 2 ���� (1�� 

Paso 3: 

1000����) = 0,002 �� = ��. ����−����

-Usar ecuaciones.

Si queremos encontrar la cantidad de volumen necesario para preparar una determinada solución debemos tener en  cuenta que datos nos da el ejercicio. Sabemos que la solución ya diluida tiene 1500 ml de volumen y una masa de  2.10-3m.  

Entonces, usando esta ecuación:

Tenemos:

������������������ ����������������������.������������������ ���������������������� = ������������������ ��������������..������������������ ��������������. 2��. ������������������ ���������������������� = 2.10−3 ��. 1500����.

������������������ ���������������������� =2.10−3 ��. 1500����.

(M en esa fracción se cancela). RESPUESTA: 1,5Ml sc. 

2��= ��, �� ���� �������� �������������� ���� ���������������� ����������������������.

a) Resolución: [pic 2]

Paso 1: 

-Escribir los datos que tenemos.

NaOh. m = ? Mr = 40g/mol.

V = 500 ml. Sc = 40 mM.

Paso 2: 

-Cambio de unidades. Esto es útil para que las ecuaciones se vuelvan más sencillas más adelante en el ejercicio. 40 ���� (1��

Paso 3: 

-Relación de proporcionalidad. Regla de 3.

1000����) = ��, ���� ��

1000 ml sc 🡪 0,04 moles st.

500 ml sc 🡪 x = 0,02 mol ST. Esta es la masa.  

Paso 4: 

-Nos están pidiendo gramos de un soluto de 40g/mol para preparar 500 ml de una solución de 0,04 M. Ya sabemos  que hay 0,02 moles de soluto en la solución final, entonces:

0,02 ������ =��

40��/������

0,02 ������. 40��

������ = ��

��, ���� �� = ��. Usaremos 0,08 gramos de NaoH sólidos.

b) 

Paso 1. 

-Nos piden expresar en molar, y ya sabemos que es 0,04 M por el cambio de unidades de antes. Debemos expresar  en % masa en volumen, y para eso, calculamos cuantos gramos de NaOH hay en 100 ml de solución. 500 ml de SN 🡪 0,8 g de NaOH.

100 ml de SN 🡪 �� =100 ���� �� 0,8 �� 

500 ����= ��, ���� ������������ ���� ��������. 

Respuesta: Necesitamos 0,8 gramos de NaOH para preparar 500 ml de una solución 40 mM. La solución es 0,04 M y  16% masa en volumen.

Paso 1. 

[pic 3]

-Consideramos los datos que nos dan, tenemos:

STOCK DE Tris-Hcl 1M pH 8. EDTA 0.5 M 

Queremos hacer 1 litro, con Tris-Hcl 10mM (el pH no varía), y EDTA 1mM. 

Paso 2.

-El Stock de Tris-Hcl es 1M, ergo, 1 mol o 1000 milimoles en un litro. Nosotros queremos 10 milimoles, no mil.  Hacemos regla de tres:

1000 ml de SN 🡪 0,8 g de NaOH.

100 ml de SN 🡪 �� =100 ���� �� 0,8 �� 

500 ����= ��, ���� ������������ ���� ��������. 

TP 01. EXTRACCIÓN DE ADN CROMOSÓMICO DE Escherichia coli 

1) [pic 4]

a) Tris-HCL regula el pH y evita posibles cambios no deseados en el momento de la lisis. b) Sacarosa evita que la célula se lise bruscamente por el ingreso de agua. Control de osmolaridad. Así, se cuida la  integridad de la célula y el medio que contiene.

c) EDTA sirve para inactivar las ADNasas que pudieran degradar al ADN. Secuestra cationes y las DNAsas requieren  de ellos para funcionar.

d) Lisozima desestabiliza la pared bacteriana ya que hidroliza las uniones entre peptidoglicanos. e) Triton-X100 es un detergente que solubiliza los lípidos de la membrana y colabora con la lisis celular. (Trabaja a  baja temperatura.

f) Acetato de Sodio. Sus iones sodio neutralizan las cargas negativas de los grupos fosfatos de las cadenas de ADN,  evitando la reproducción entre las hebras y estabiliza la molécula.

g) Etanol 100% está en frio, cambia la polaridad del medio y el ADN precipita en forma de hebras y se puede  recuperar mientras se enrolla en la varilla.

h) Etanol 70% permite eliminar las sales presentes en la preparación. En estas condiciones se solubilizan las sales  remanentes de la purificación del ADN pero no se re-disuelve el mismo.

i) El trabajo a 0°C reduce la energía cinética, y por ende, la actividad enzimática, incluida ADNasas.  

2) El ADN se enrolla a la varilla porque es una molécula muy larga y expuesta, si revolvemos el medio vamos a  arrastrarla por acción mecánica lo que desencadenara en que se envuelva en la varilla.

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