Técnicas de obtención de extractos totales y aceites esenciales, marcha preliminar y técnicas cromatográficas

Técnicas de obtención de extractos totales y aceites esenciales, marcha preliminar y técnicas cromatográficas

Techniques for obtaining total extracts and essential oils, preliminary march and chromatographic techniques 

Autores: Ordoñez L, Morales I, Acosta D, Gallego S.

Corporación Tecnológica de Bogotá - CTB

Bogotá D.C, Colombia

13 de noviembre 2019

imorales42@ctb.edu.co 

RESUMEN:

PALABRAS CLAVE:  Diente de León, Análisis fitoquímico, metabolitos secundarios, extractos.

ABSTRACT: 

1. INTRODUCCIÓN

1. MATERIALES Y MÉTODOS 

2.1.  MATERIALES

 Tabla # 1 Materiales utilizados en la práctica                                 [pic 2]

2.2 REACTIVOS

Tabla # 2 Reactivos utilizados en la práctica

[pic 3]

2.3 METODOLOGÍA

2.3.1. Obtención de extractos totales y aceites esenciales

2.3.1.1. Extracción por maceración en frío

• Pesamos 5 g de material vegetal seco y agregarlos a un vaso de precipitado con un volumen de etanol que cubría completamente el material vegetal (diente de león)
• Agitamos la muestra de manera constante durante dos horas de maceración.

• Filtramos la muestra con ayuda de un trozo de algodón y almacenamos en un frasco ámbar.

[pic 4]

Figura # 1 material seco (diente de león) con etanol

2.3.1.2. Extracción por Soxhlet

• Envolvimos en un “cartucho” de papel filtro de 3 g de material vegetal seco.

• Ubicamos el cartucho dentro de la camisa del Soxhlet y realizamos el montaje
• Adicionamos lentamente en la camisa del Soxhlet etanol hasta que llegó a la altura del sifón y ocurrió el primer sifón. Continuamos agregando etanol hasta que ocurrió un segundo sifón.
• Calculamos 2 horas de extracción.
• Apagamos el calentamiento, dejamos enfriar, desmontamos el equipo y almacenamos el extracto en un frasco ámbar.

[pic 5]

Figura #  2 Montaje extracción por Soxhlet

2.3.1.3. Extracción por arrastre con vapor

• Agregamos en un balón aproximadamente 8 gramos de material vegetal fresco (hojas menta)
• Realizamos el montaje de arrastre por vapor
• Recolectamos en un Erlenmeyer el agua floral, y la almacenamos en un frasco ámbar.

2.3.2 Marcha Fitoquímica Preliminar

2.3.2.1. Fraccionamiento con éter de petróleo:

• En un embudo de decantación, vertimos 10 ml del extracto etanólico.
• Agregamos 5 mL de éter de petróleo, agitamos y esperamos a que se separen las fases etanólica y etérea.

• Con la fase etérea (fase superior) aplicamos la prueba A para carotenoides y B para esteroides y triterpenos.

[pic 6]

Figura #  3 Separación fase etanolica y etérea

[pic 7]

Figura #  4 Fase Etérea y fase Etanolica

2.3.2.2. Lavado con HCl al 5%

• Tomamos 5 mL de la fase etanólica (fase inferior) y lo adicionamos en una capsula de porcelana.
• Calentamos hasta completa sequedad.
• Esperamos a que la capsula de porcelana se enfriara y agregamos 10 mL de HCl al 5 %, agitamos vigorosamente raspando las paredes de la capsula mientras se calentaba durante 2 minutos.
• Filtramos hasta obtener una solución traslúcida.

2.3.2.3 Pruebas Realizadas con fase etérea

[pic 8]

2.3.2.4 Pruebas Realizadas con fase etanolica

[pic 9][pic 10]

2.3.2.4 Pruebas Realizadas con extracto ácido [pic 11]

2.3.3. Técnicas cromatográficas

2.3.3.1 Cromatografía en placa fina

• Se prepararon las siguientes fases móviles

• Se añadieron en un vaso de precipitados, de manera que la altura del solvente en el recipiente fuese inferior a 1 cm. Tapamos los recipientes con papel aluminio.
• Dejamos reposar la cámara cromatográfica por 20 minutos
• Trazamos una línea de 1 cm de la base y a 0,5 cm de la parte superior.
• Sembramos 1 punto con ayuda de un capilar en el centro de la placa, el extracto etanólico de la especie de diente de león.

[pic 12]

Figura #  5 Siembra de extracto etanolico de diente de león, lista para ser depositada en la fase móvil # 1

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