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Vibrio cholerae biotipo clásico cepas revelan distintas firmas en México

ABSTRACTO

Vibrio cholerae O1 clásica (CL) biotipo causó la quinta y sexta pandemia, y, probablemente, las pandemias de cólera antes, antes de la (ET) biotipo El Tor inició la séptima pandemia en Asia en la década de 1970, desplazando por completo el biotipo CL. Aunque el biotipo CL se creía extinta en Asia y aunque nunca había sido reportado en América Latina, V. cholerae CL y ET biotipos, como un híbrido de ET, se encontraron asociados con áreas de cólera endémico en México entre 1991 y 1997. En este estudio, las cepas de biotipo CL aisladas de las zonas de cólera endémico en México entre 1983 y 1997 se caracterizaron en términos de las principales características fenotípicas y genéticas y se compararon con las cepas del biotipo CL aisladas en Bangladesh entre 1962 y 1989. Según serológicas y datos biotipificación, todas V. cholerae cepas probadas tenían las principales características fenotípicas y genotípicas específicas para el biotipo CL. Antibiogramas revelaron que la mayoría de las cepas de Bangladesh para ser resistentes a trimetoprim-sulfametoxazol, furazolidona, ampicilina, y gentamicina, mientras que las cepas mexicana fueron sensibles a todos estos fármacos, así como a la ciprofloxacina, eritromicina, y tetraciclina. Electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE) de ADN genómico digerido con NotI reveló patrones de bandas características para todas las cepas de biotipo CL aunque las cepas mexicanas difieren de las cepas de Bangladesh en 1 a 2 bandas de ADN. La diferencia era sutil pero constante, según lo confirmado por los patrones subclustering en el dendrograma PFGE basado, y puede servir como una firma regional, lo que sugiere la existencia antes de 1991 y la evolución de las cepas de biotipo CL en las Américas, independientemente de Asia.

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INTRODUCCIÓN

Vibrio cholerae , el agente causante del cólera, es uno de los emergentes más exitosas y reemergentes patógenos que tiene componentes humanos y del medio ambiente en su ciclo de vida ( 23 ). Hay más de 200 diferentes serogrupos de V. cholerae , pero sólo O1 y O139 son reconocidos como responsables de la epidemia y pandemia de cólera ( 17 ). V. cholerae O1, que es la pandemia del serogrupo predominante hasta la fecha, se diferencia además en dos biotipos bien establecidos, a saber, la clásica (CL) y El Tor (ET). Esta clasificación se basa principalmente en varias propiedades fenotípicas, incluyendo hemólisis de glóbulos rojos de oveja, la aglutinación de glóbulos rojos de pollo, la reacción de Voges-Proskauer, y la susceptibilidad a la polimixina B (50 U) y fagos biotipo-específicos ( 17 ). Además de los rasgos fenotípicos, los principales marcadores genéticos también se han utilizado para determinar los biotipos de V. cholerae cepas, tales como la toxina importante coregulated gen de pilus ( tcpA ), el gen que codifica la toxina del cólera subunidad B ( ctxB ), y la secuencia de repetición regulador transcripcional (RSTR ) gen, todos los cuales poseen CL-ET-y alelos específicos, y la presencia o ausencia de la repetición en la toxina ( RTXC ) gen ( 28 ). Recientemente, dos islas genómicas, Vibrio séptima pandemia de isla I (VSP-I) y VSP-II, se mostró a ser única para las cepas de ET de la séptima pandemia, en que estuvieron ausentes en ambas la pre-séptima pandemia de ET y cepas las cepas del biotipo CL ( 11 ).

Desde 1817, el cólera se ha convertido en una pandemia, la difusión en una multitud de países. La sexta pandemia y pandemias presumiblemente a principios de cólera fueron causados por el V. choleraebiotipo CL, mientras que el más amplio y permanente, séptima pandemia, que comenzó en 1961, es causada por el biotipo ET ( 15 ). Fue después de la sexta pandemia que la V. cholerae biotipo CL fue gradualmente reemplazado por El Tor, y en una década el biotipo CL parecía haber desaparecido ( 3 , 4). Sin embargo, el biotipo CL resurgió como el biotipo epidemia predominante en algunas áreas de Bangladesh en 1982 y coexistió con cepas El Tor durante unos años, hasta finales de 1980 ( 29 ). A pesar de tener una misteriosa historia de la desaparición y reaparición en Bangladesh, se pensaba que el biotipo CL se han extinguido, con su último aislamiento que se está grabando en 1992 en el sur de Bangladesh ( 13 , 17 ).

Cuando la epidemia de cólera que azotó Perú en enero de 1991 y se extendió rápidamente a otros países de América Latina, llegando a México en junio del mismo año, el agente causal, V. cholerae O1 El Tor, fue homogénea y considerado como una extensión de la séptima pandemia ( 30 ), presumiblemente a través de barcos que llegan de las zonas de cólera endémico ( 20 ). Esta suposición se basa probablemente en la observación de que no había habido ninguna señal de cólera en Sudamérica, Centroamérica o América del Norte durante más de un siglo. Recientemente, sin embargo, V. choleraecepas variantes híbridas El Tor se mostró a ser dominante entre V. cholerae CL y ET cepas progenitoras biotipo asociados con cólera endémico en México entre 1991 y 1997 ( 2 ). Aunque el pre-y post-1991 existencia de V. cholerae biotipo cepas CL junto con ET híbridos y cepas prototipo ET hasta 1997 era sugestiva de un reservorio ambiental local en México ( 2 ), se sabe poco acerca de sus características fenotípicas y genéticas y, más concretamente, su ascendencia a discernir si el biotipo CL cepas aisladas de cólera endémico en México fueron evolucionando de forma local o eran de origen asiático. En el presente estudio, los datos fenotípicos, molecular y filogenética comparativos relacionados con V.cholerae biotipo CL cepas aisladas en México ( n = 6; 1983-1997) y Bangladesh ( n = 22; 1962-1989) han sido analizados, y los resultados muestran que el V. cholerae biotipo cepas CL pueden haber evolucionado independientemente en los dos ecosistemas geográficamente distantes.

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MATERIALES Y MÉTODOS

Cepas bacterianas.

V. cholerae (CL) de las cepas O1 biotipo clásico ( n = 28) que participan en este estudio incluyeron 6 cepas aisladas en México (1983-1997) y 22 cepas aisladas en Bangladesh (1962 a 1989). El V. cholerae referencia CL cepa O395 y referencia El Tor (ET) cepa N16961 también se incluyeron para la comparación. Los aislamientos mexicanos se obtuvieron del Departamento de Salud Pública de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM). Estas cepas se aislaron de cólera pacientes ( n = 4) y el agua superficial ( n = 2) como parte del programa de vigilancia de cólera en todo el país entre

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