Informe de laboratorio LABORATORIO DE BIOQUIMICA II
Enviado por fabianp • 23 de Noviembre de 2016 • Informes • 2.086 Palabras (9 Páginas) • 1.171 Visitas
UNIVERSIDAD DEL CAUCA[pic 1]
FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES, EXACTAS Y DE LA EDUCACIÓN
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
LABORATORIO DE BIOQUIMICA II
II PERIODO DE 2016
CUERPOS CETÓNICOS
Salamanca A, Camayo F.
Química, Facultad de Ciencias Naturales Exactas y de la Educación, Universidad del Cauca, Popayán Colombia
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- Abstract
For the determination of ketone bodies in the urine, urine was used fasting and another after ingesting food. testing was conducted to characterize different ketone bodies present in these samples. The test Griebel and Weiss is specific to acetone test Legal determines the presence of acetone and acetoacetate, test Gerhardt is characteristic for acetoacetate, test Lieben is characteristic for acetone test Arreguine is characteristic for acetoacetao , with which the presence of ketone bodies in different urine samples was determined.
- Objetivos.
- Determinación cualitativa de cuerpos cetónicos mediante la aplicación de una serie de reacciones químicas.
- Realizar pruebas cualitativas con el uso de un blanco y un patrón para la determinación de cuerpos cetónicos en una muestra de orina antes y después del desayuno.
- Datos y resultados.
Tabla # 1. Resultados de las pruebas Cualitativas.
Prueba | Coloración | Ayuno | |
Legal (caract. De la acetona y en acetoacetato) | Muestra de orina | Rojo | |
Muestra patrón | Rojo intenso | ||
Muestra blanco | Amarillo | ||
Prueba de Gerhardt | Muestra de orina | Precipitado amarillo ++ | |
Muestra de patrón | Precipitado amarillo + | ||
Muestra blanco | No se observa precipitado | ||
Prueba de Lieben | Muestra de orina | Rojo claro | |
Muestra de patrón | Rojo intenso | ||
Muestra blanco | No reacción | ||
Griebel y Weiss | Cristales amarillos | Cristales amarillos | |
Prueba arreguine | H2SO4 | UV | |
Muestra de orina | Rojo | Azul | |
Muestra patrón | Rojo | Negativo | |
Blanco | Rojo | Negativo |
- Discusión de Resultados.
Figura # 1. Reacción para la formación de cuerpos cetónicos.
[pic 2]
La formación de acetoacetato se lleva a cabo en tres reacciones:
La formación de acetoacetil-CoA se produce por condensación de dos moles de acetil-CoA. Esta reacción es esencialmente una inversión de la tiolasa (HADHB o ACAA2) reacción catalizada de β-oxidación, pero es en realidad catalizada por la enzima mitocondrial acetoacetil-CoA tiolasa (codificada por el gen ACAT1). La segunda es la condensación de acetoacetil-CoA con un tercer acetil-CoA por la HMG-CoA sintasa que forma β-hidroxi-β -metilglutaril-CoA (HMG-CoA: que también es un precursor en la biosíntesis del colesterol). El mecanismo de reacción recuerda la reacción reversa catalizada por la tiolasa, en la cual, en el sitio activo un grupo tiol forma un intermediario acil-tioéster. En la tercera se da la degradación de HMG-CoA a acetoacetato y acetil-CoA, por la HMG-CoA liasa; el mecanismo de esta enzima es análogo a la reacción reversa de la citrato sintasa. En la actualidad no se sabe por qué esta aparentemente simple hidrólisis ocurre en esta manera indirecta, [1].
El acetoacetato puede ser reducido a D-β -hidroxibutirato por la β-hidroxibutirato deshidrogenasa.
Figura # 2. Formación del D-β -hidroxibutirato
[pic 3]
Este producto es el estereoisómero del L-β-hidroxiacil-CoA que participa en la β-oxidación.
El acetoacetato, que es un cetoácido, también puede ser descarboxilado no enzimáticamente a acetona y CO2.
La expiración de los individuos que tienen cetósis, enfermedad en la cual el acetoacetato se produce más rápido de lo que puede ser metabolizado tiene un característico olor dulce a acetona, lo cual puede ser un síntoma de la diabetes. El hígado libera acetoacetato y beta-hidroxibutirato que son llevados por el torrente sanguíneo a los tejidos periféricos para ser usados como combustibles alternativos, en los cuales son convertidos a acetil-CoA, [1].
Cuando el nivel de glicógeno en el hígado es alto la producción de β-hidroxibutirato aumenta. Cuando la utilización de carbohidratos es baja o deficiente, el nivel de oxaloacetato también será bajo, dando por resultado un flujo reducido durante el ciclo del TCA. Esto a su vez lleva a la liberación creciente de cuerpos cetónicos del hígado para que puedan ser utilizados como combustible por otros tejidos. En los estadios tempranos del ayuno, cuando los últimos remanentes de la grasa se oxidan, el corazón y el músculo esquelético consumirán sobre todo cuerpos cetónicos para preservar la glucosa para uso del cerebro. El acetoacetato y el β-hidroxibutirato, particularmente, también sirven como substratos importantes para la biosíntesis de lípidos cerebrales neonatales, [1].
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