PRÁCTICA. Efecto del pH y la concentración de la intensidad de fluorescencia de la riboflavina
Enviado por Li123Co • 16 de Marzo de 2020 • Informes • 830 Palabras (4 Páginas) • 244 Visitas
Instituto politécnico nacional[pic 1] ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS. [pic 2] DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA.Métodos de análisis. |
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O B J E T I V O S:
- Conocer y manejar el fluorómetro, identificar diferencias con espectrofluorómetro.
- Identificar diferencias entre fluorescencia y fosforescencia.
- Determinar el efecto del pH sobre la intensidad de la fluorescencia de la riboflavina.
- Determinar el efecto de la concentración sobre la intensidad de la fluorescencia de la riboflavina.
R E S U L T A D O S:
Cálculo de las concentraciones.
0.0125 g equivalen a 50 ppm, disueltos en 250 ml de agua. Alícuota de 10 ml. Se traspasa a matraz aforado de 50 ml F.D.= (Volumen final/Volumen alícuota) = 1:5 50 ppm ÷ 5 veces fue diluido = 10 ppm | Del matraz de 50 ml que contiene 10ppm Se toman alícuotas de 1, 2, 3, 4 y 5 ml y se disuelven en 10 ml. F.D. (matraz 1): 1:10 10ppm ÷ 10 veces diluido = 1 ppm. F.D. (matraz 2): 1: 5 10 ppm ÷ 5 veces diluido = 2 ppm. F.D. (matraz 3): 1: 3.33 10 ppm ÷ 3.33 veces diluido = 3.003 ppm F.D. (matraz 4) = 1: 2.5 10ppm ÷ 2.25 veces diluido = 4.44 ppm F.D. (matraz 5): 1:2 10 ppm ÷ 2 veces diluido = 5 ppm |
Tabla 1. Resultados de la curva de calibración de riboflavina en diferentes medios.
Riboflavina (ppm) | Intensidad de la fluorescencia en H2O | Intensidad de la fluorescencia en HCl 0.1 M | Intensidad de la fluorescencia en CH3COOH 0.9 M | Intensidad de la fluorescencia en NaOH 0.1 M |
0 | 4.95 | 4.95 | 4.95 | 4.74 |
1 | 5.78 | 5.03 | 5.74 | 4.95 |
2 | 6.54 | 5.11 | 5.90 | 4.97 |
3 | 7.24 | 5.18 | 7.10 | 4.97 |
4 | 7.88 | 5.25 | 7.65 | 4.98 |
5 | 8.54 | 5.31 | 8.24 | 4.98 |
10 | 11.06 | 5.63 | 10.37 | 5.01 |
50 | 15.03 | 6.39 | 12.88 | 5.05 |
pH | 5 | 1 | 4 | 13 |
[pic 3]
Figura 1. Relación entre la intensidad de la fluorescencia y la concentración de la riboflavina en ppm de los 4 medios utilizados en todas las concentraciones utilizadas.
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