Efecto del pH y concentración de enzima sobre la velocidad de reacción
Enviado por Raul Vargas Arteaga • 12 de Marzo de 2021 • Informes • 1.009 Palabras (5 Páginas) • 1.083 Visitas
INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL [pic 1][pic 2]
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
BIOQUÍMICA GENERAL
Practica 6: Efecto del pH y concentración
de enzima sobre la velocidad de reacción.
Grupo. 4QV1
Efecto del pH sobre la velocidad de reacción.
INTRODUCCIÓN:
A bajas concentraciones de protones (pH alto), las formas de la enzima que predominan son E y ES. A muy altas concentraciones de protones (pH bajo) se observa que la actividad es pequeña, ya que las formas de la enzima que predominan son las doblemente protonadas, las cuales tampoco catalizan la transformación del sustrato a producto. Por tanto, existe una concentración intermedia de protones (pH óptimo) en el cual predomina la actividad enzimática y donde se alcanza la máxima actividad.
La desnaturalización de la enzima es otro factor que influye en la pérdida de actividad a pH bajo o alto. La pérdida es de carácter irreversible, por lo que la actividad no se recupera completamente cuando la enzima se transfiere a un medio con pH óptimo. Este efecto del pH está más relacionado con la estabilidad de la proteína que con los grupos funcionales que participan directamente en la catálisis.
El pH óptimo se caracteriza por presentar una gráfica de campana.
OBJETIVO:
Analizar la importancia del pH del medio sobre la velocidad de una reacción enzimática y su efecto sobre el carácter iónico de la enzima y del sustrato.
RESULTADOS:
Tabla 1. Valores obtenidos y calculados para poder obtener la gráfica del efecto de pH en la velocidad de reacción.
Tubo No. | Absorbancia | Azúcar reductor (uM) | Velocidad (Unidades de Invertasa) | pH |
Testigo | 0 | 0 | 0 | |
1 | 0 | 0.3018 | 0.03018 | 3 |
2 | 0.131 | 1.3421496 | 0.13421496 | 4 |
3 | 0.502 | 4.2884832 | 0.42884832 | 4.5 |
4 | 0.862 | 7.1474592 | 0.71474592 | 5 |
5 | 0.802 | 6.6709632 | 0.66709632 | 6.5 |
6 | 0.254 | 2.3189664 | 0.23189664 | 7.5 |
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Figura 1. Curva tipo con la Interpolación del valor de absorbancia del efecto de pH.
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Figura 2. Curva tipo con la Interpolación del valor de absorbancia del efecto de pH en hoja milimetrada.
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Figura 3. Campana de Gauss. Velocidad de reacción y efecto del pH. En rojo se señala el pH óptimo.
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Figura 4. Campana de Gauss. Velocidad de reacción y efecto del pH en hoja milimetrada.
DISCUSIÓN:
A valores superiores o inferiores del pH óptimo la actividad disminuye. Algunas cadenas laterales de los aminoácidos pueden actuar como ácidos y bases débiles que desarrollan funciones críticas en el sitio activo de la enzima que dependen del mantenimiento de cierto estado de ionización. La concentración de H + afecta la velocidad de reacción en muchas formas. En la Figura 3 se observa que la gráfica tiene un comportamiento en forma de campana que muestra que el punto máximo de esta es el pH óptimo de la invertasa. Del lado izquierdo de la campana, se encuentran los pH subóptimos y del lado derecho los pH en los cuales la actividad enzimática disminuye hasta su posterior desnaturalización.
CONCLUSIONES:
El arreglo espacial, su afinidad y la unión entre la invertasa y la sacarosa se ven modificados por cambios en el pH.
El pH óptimo de la enzima invertasa es de 5, en el cual esta su actividad máxima enzimática.
REFERENCIAS:
Laguna J, Piña Garza E. 2007. Bioquímica de Laguna. Manual Moderno. 6a ed. México. 135-137 pp.
Berg, J, M., Tymoczko, J, L., & Stryer, L (2011). Bioquímica. 6ª Edición, Editorial Reverté. 211-213 pp.
Cox, M.M., Nelson D.L. (2009). Lehninger: Principios de bioquímica. Omega. (5ª Edición) España. 204 pp.
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