ACCIÓN DE LAS ENZIMAS

EXPERIMENTO No

ACCIÓN DE LAS ENZIMAS

Fundamento Teórico

Muchas reacciones biológicas son sumamente lentas. Sin embargo los organismos poseen moléculas que entran en acción cuando se requiere acelerar la velocidad .

Son las enzimas los catalizadores metabólicos que aceleran notablemente la velocidad de estas reacciones biológicas.

Se estima que el ser humano posee alrededor de 100.000 enzimas diferentes y cada una de ellas tiene una actividad específica a la temperatura corporal y se desactivan a temperaturas más altas o más bajas.

El empleo de métodos de enfriamiento o de congelación para conservar alimentos o medicamentos se basa en el hecho de que a bajas temperaturas reducen la actividad enzimática.

Los nombres de las enzimas terminan en ASA adjunto al del sustrato sobre el cual actúa la enzima. Así por ejemplo las peptídasas son enzimas que actúan sobre los péptidos, las lipasas actúan sobre los lípidos, las oxidasas y peroxidasas conducen a oxidaciones, y las reductasas producen reducciones.

Sustrato producto

Enzima

La acción de las enzimas puede evidenciar por la aparición del producto o por al desaparición del sustrato.

Se proponen investigar la presencia del complejo enzimático catalasa -peróxido-dismutasa que se encuentra en la mayoría de las células animales como muestra de hígado crudo y cocido, vegetales frescos tales como apio, papa, etc. Y en levaduras .para ello se utilizará agua oxigenada como sustrato ( o reactivo), observándose el desprendimiento de oxígeno( producto) debido a la acción de las enzimas

El pH óptimo para la acción del complejo enzimático es cercano a 7. Las enzimas son sensibles al calor, perdiendo la actividad al ser calentadas.

2H2O (ac) 2H2O (l) + O2(g)

PARTE EXPERIMENTAL

Materiales

Gradilla y 12 tubos de ensayo 18cm.- Pipetas graduadas de 5cm3.- Mechero.- Reverbero que funcione.- Soportes metálicos.- Papel filtro.- Espátulas metálicas.- Vasos de precipitación de 100y 250cm3.- Astillas de madera o palillos sin algodón.- Cuchillo.- Cucharillas. Sorbetes.

Reactivos

Agua oxigenada de : 10 volúmenes y 30 volúmenes.- Trozos de frutas, vegetales u hojas verdes( apio, papa, pepino , pepinillo, tomate , manzana, cebolla,

Banana, etc.).- levadura de cerveza.- Trocito de hígado y de carne de res (1x1cm).-varios vasos de plástico transparente.- Solución fresca de Lugol.- Almidón 2% previamente hervido y filtrado.- Solución fresca de Fehling I y II.- Indicadores: en solución Tornasol, anaranjado de metilo Fenolftaleína y papel con escala.- Dióxido de manganeso en polvo. Hidróxido de sodio 2 N y ácido clorhídrico concentrado, vinagre sin aceite.-

Procedimiento

1.- Cortar en trocitos las frutas y las verduras y aplastarlos ligeramente en el mortero

2.- Transferir estos contenidos los diferentes vasos. Proceder de igual manera con la levadura de cerveza y con los trocitos de hígado crudo y cocido

3.- Agregar a cada vaso un volumen 3-5 cm3 de agua destilada agitar y mezclar .

4.- Medir el pH de las suspensiones con el papel indicador graduado

5.- Añadir luego 10-15 cm3 de agua oxigenada. Esperar unos minutos y observar

6.- Medir nuevamente el pH y correlacionar con las de suspensiones solo en agua destilada

7.- Registrar todos los resultados.

8.- Clasificar los alimentos utilizados según la actividad o no actividad catalítica manifestada en la descomposición del agua oxigenada

Variante I

- Seleccionar una muestra que demostró una elevada actividad enzimática.

- Corte un nuevo pedazo y macharlo en el mortero. Pasar a un tubo de ensayo , agregar 5 cm3 de agua destilada Llevar a ebullición por unos minutos. Dejar enfriar y añadir 10-15 gotas de agua oxigenada. Apreciar lo que ocurre y comparar con los resultados anteriores .para concluir que el calor inhibe la acción de la enzima

Variante II

- Tomar en un tubo de ensayo unos dos cm3 de agua oxigenada y agregar una pizca de dióxido de manganeso. Calentar la solución y observar.

-Probar el gas que sale con una astilla activada.

- Describir la semejanza de este ensayo con los realizados sobre muestras naturales

DESCOMPOSICIÓN DEL AGUA OXÍGENADA

Por acción del MnO2 Por acción Enzimática

SEMEJANZAS

DIFERECIAS

3.- Hidrólisis de almidón

Se apreciaría la acción de la enzima amilasa o ptialina presente en la saliva. Esta enzima actúa sobre el polisacárido almidón, hidrolizando el enlace O-glicosídico, por lo que el almidón se terminará por transformar en unidades de glucosa.

Para esto numerar cuatro tubos de ensayo 1,2 ,3,4. Agregar desde una pipeta 1 cm3 de solución de almidón Depositar una buena cantidad de saliva, usando un sorbete en los tubos 3 y 4. En el tubo 1 colocar un cm3 de la solución de Feheling y el tubo 2 5 gotas de lugol, observar con detenimiento los colores.

A los tubos 3 y 4 calentarlos en un baño maría por unos 5 minutos y probar la hidrolisis del almidón con Fehling en medio básico y el otro tubo con lugo

EXPERIMENTO No

LAS PROETEASA

Fundamento teórico

Las proteínas están formadas por cadena de aminoácidos, unidos entre sí por uniones peptídicas. Las proteasas

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