Problemas enzimas
Enviado por Oscar Jiménez • 6 de Octubre de 2015 • Prácticas o problemas • 1.140 Palabras (5 Páginas) • 3.166 Visitas
ENZIMAS
- La penicilina es hidrolizada y con ello inactivada por la penicinilasa, enzima presente en las bacterias resistentes al antibiótico, y en un experimento se obtienen los siguientes resultados:
[penicilina] | penicilina hidrolizada |
moles X l0-5 μM | moles X l0-6 o μM |
0.1 1 | 0.11 |
0.3 3 | 0.25 |
0.5 5 | 0.34 |
1.0 10 | 0.45 |
3.0 30 | 0.58 |
5.0 50 | 0.61 |
La masa de la enzima en Staphylococcus aureus es de 29.6 kd. Para el ensayo se midió la cantidad de penicilina hidrolizada en un 1minuto en 10 ml de solución con 10 g de penicilinasa pura, en función de la concentración de penicilina (se supone que la concentración de penicilina no se modifica apreciablemente durante el ensayo).
[pic 1]
1 / [Penicilina] (inversa) | 1 / (penicilina hidrolizada) (inversa) |
1 | 9.09 |
0.33 | 4 |
0.2 | 2.94 |
0.1 | 2.22 |
0.033 | 1.72 |
0.02 | 1.64 |
[pic 2]
a) ¿Obedece la penicilinasa a una cinética de Michaelis-Menten? Si
b) De ser así determine el valor de Km y de la Vmax.
Dada la regresión lineal y=7.6244x+1.463
[pic 3]
[pic 4]
[pic 5]
[pic 6]
c) Determine el número de recambio de la enzima bajo estas condiciones, supóngase un centro activo por molécula de enzima.
[pic 7]
- El salicilato es un inhibidor de la glutámico deshidrogenasa (GDH). En un ensayo de la actividad de la enzima se obtuvieron los siguientes datos:
[glu] mM | mg de NH4 /min, | |
sin salicilato | con salicilato | |
1.5 | 0.21 | 0.08 |
2.0 | 0.25 | 0.10 |
3.0 | 0.28 | 0.12 |
4.0 | 0.33 | 0.13 |
8.0 | 0.44 | 0.16 |
16.0 | 0.42 | 0.18 |
Realice la gráfica de concentración de sustrato contra actividad enzimática. Determine de forma analítica el Km y Vmax para cada caso, así como el tipo de inhibición que presenta el salicilato y su Ki sabiendo que la concentración empleada de salicilato es de 5mM.
[pic 8]
[pic 9]
Inversos | ||
1 / [ Glu ] (mM) | 1 / (mg de NH4/min sin salicilato) | 1 / (mg de NH4/min con salicilato) |
0.66 | 4.76 | 12.5 |
0.5 | 4 | 10 |
0.33 | 3.57 | 8.33 |
0.25 | 3.03 | 7.69 |
0.125 | 2.27 | 6.25 |
0.0625 | 2.38 | 5.55 |
[pic 10]
Dada la regresión lineal y = 4.2029x + 1.9848
[pic 11]
[pic 12]
[pic 13]
[pic 14]
[pic 15]
Dada la regresión lineal y=11.209x + 4.7859
[pic 16]
[pic 17]
[pic 18]
[pic 19]
Este es un inhibidor no competitivo pues la Km prácticamente es la misma.
[pic 20]
[pic 21]
- La enzima L-aspartato transcarbamilasa (ATCasa) cataliza la reacción:
Carbamil fosfato + L-aspartato Carbamil aspartato + Pi[pic 22]
En la ruta de síntesis de nucleótidos trifosfato pirimidinicos (CTP y UTP). Se midió la velocidad de la reacción de la enzima con respecto al aspartato en presencia y ausencia de ATP, dando los siguientes datos:
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