Utilización de glucosa de acuerdo a la estimación de crecimiento de las levaduras conservadas en la práctica de selección primaria.

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Fig 1.- Utilización de glucosa de acuerdo a la estimación de crecimiento de las levaduras conservadas en la práctica de selección primaria

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Fig 2.- Utilización de celobiosa de acuerdo a la estimación de crecimiento de las levaduras conservadas en la práctica de selección primaria

Se llevó a cabo la determinación de la utilización de carbohidratos y la estimación del crecimiento, empleando una serie de carbohidratos.
La  glucosa  (C6H12O6)  pertenece a los monosacáridos del grupo de las hexosas. Es la fuente primaria de energía y contribuye a la ruta metabólica de la glucólisis (Embden-Meyerhof-Parnas) para obtener piruvato, siento el carbohidrato más fácil de metabolizar y obtener ATP.

La glucosa es la principal fuente de carbono para las levaduras, un ejemplo es Saccharomyces cerevisiae. Aunque las levaduras pueden utilizar una amplia gama de fuentes de carbono, la presencia de glucosa suprime actividades moleculares implicadas en el uso de fuentes de carbono alternativas, por lo que prefiere un metabolismo fermentativo a pesar de presencia de oxígeno, y reprime la respiración y la gluconeogénesis. (Kayikci y  Nielsen,  2015)
Los genes para la glucolisis se presentan de manera constitutiva por lo que el aprovechamiento de este carbohidrato es muy elevado, si se encuentra como sustrato, siendo el primer metabolito como fuente de carbono aprovechado por las levaduras.
Aunque las levaduras puede utilizar una amplia gama de fuentes de carbono, la glucosa es la fuente de carbono más ampliamente preferido para la fermentación de levaduras; La expresión dependiente de la concentración de glucosa de genes HXT se consigue mediante una compleja interconexión de tanto la inducción de la glucosa y mecanismos de represión de glucosa (Horák, 2013)

A partir de las 14 cepas de levaduras obtenidas de llevo a cabo la siembra, se obtuvo una densidad de células ajustando al tubo 1 de McFarland, que corresponde a una densidad de 3.0 x 108 células, para evitar la variable y que el inóculo fuera homogéneo a través de una asa calibrada  en medio base para levaduras adicionado con glucosa.
En todas las cepas se observa un crecimiento favorable (++++) (Tabla 1)  obteniendo el mayor valor de rango de crecimiento proporcionado, sin embargo se descarta la cepa A (fig 1), debido a que en la verificación de la pureza, la morfología microscópica pertenecía a bacterias. Además de que las cepas L y M (fig 1) no presentan crecimiento, por lo tanto se sugiere que el proceso de conservación no fue adecuado y las células no estaban viables.

Se corroboro que la glucosa es un carbohidrato de fácil asimilación para las levaduras, obteniendo un crecimiento proliferativo, en el cual se utilizaría para la producción de biomasa.

La celobiosa (C12H22O11), es un disacárido, formado por dos glucosas unidas mediante un enlace β (1-4). Es un disacárido que no se encuentra libre en la naturaleza. Se obtiene por la hidrólisis parcial  de celulosa a través de las enzimas β-glucosidasas (celobiasas) que actúan en la etapa final de los procesos naturales de descomposición de la celulosa.
Para el metabolismo de celobiosa  se realizó la siembra de la misma manera que glucosa ajustando al tubo 1 de McFarland y sembrando con el asa calibrada.
Los microorganismos celulolíticos prefieren la celobiosa a la glucosa, como nutriente. La celobiosa penetra por medio de un transportador En el interior de la célula (en la membrana o en el citoplasma) actúa la celobiosa fosforilasa (Church, 1993).  Estos microorganismos  se encuentran en los sistemas digestivos de los rumiantes, que tienen la capacidad de degradar y fermentar los polisacáridos de las paredes vegetales (rico en celulosa) en compuestos asimilables para el rumiante hospedador como glucosa.
La cepa B es la que obtuvo un mayor desarrollo en el medio con celobiosa, por lo tanto puede metabolizar este compuesto. Las cepas F, G, I, K y N, muestran un crecimiento abundante, por lo que se sugiere de igual manera que utilizan este sustrato como fuente de carbono. Las demás cepas muestra un bajo crecimiento, por lo que se sugiere que puede que aprovecharan algunas otras fuentes de carbono presentes del medio base (fig 2).

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