HISTOLOGÍA Y HEMATOLOGÍA

HISTOLOGÍA Y HEMATOLOGÍA

HISTOLOGÍA (Gr. histo, tejido o red; logos, estudio)

 “Es el estudio de los tejidos del cuerpo y de cómo se organizan estos tejidos para constituir órganos”.

 “Rama de la anatomía que estudia a los tejidos de los animales”.

 “Anatomía microscópica + Función “

“La histología es la ciencia que estudia la microestructura y su relación con la función en los organismos”

 “Comprender la microanatomía de las células, tejidos y órganos y a correlacionar la estructura con la función”.

MARCELLO MALPIGHI (1628-1694)[pic 1]

Padre de la histología

(microanatomía)

Médico italiano, anatomista, botánico, histólogo y biólogo.

Usando el microscopio, inventado durante esa época, desarrolló métodos para estudiar organismos vivos.

Lo cual contribuyo al inicio del desarrollo en la ciencia de la anatomía microscópica.

TEJIDO

Reunión de células morfológicamente iguales que realizan una misma función.

• Componentes de los tejidos:

• Células: Materia viva y, en algunos casos, unidades fundamentales en la función de un tejido.
• Sustancia intercelular: Se encuentra entre las células, permite su nutrición, el cual constituye su medio interno con el que intercambia sustancias, brinda sostén, relleno y propiedades físicas al tejido.

[pic 2]NIVELES DE ORGANIZACIÓN.

• Célula: unidad más pequeña en la estructura y función del cuerpo.
• Tejido: grupo de células y sustancia fundamental extracelular. Cuatro tejidos básicos:
• Tejido epitelial
• Tejido conectivo
• Tejido muscular
• Tejido nervioso
• Órgano: compuesto de tejido. Tiene forma, estructura y funciones especiales
• [pic 3]Sistema: órganos que tienen una función relacionada y se mantienen estructuralmente cerca.

Método de estudio de la Histología

El procedimiento más común utilizado en el estudio de tejidos es la preparación de secciones histológicas que pueden estudiarse con la ayuda del microscopio óptico.

ESTUDIOS IN VIVO.

1. Método de la gota pendiente:[pic 4]

se utiliza para el estudio de células y microorganismos (bacterias, protozoos, etc.) inmersos en una gota, suspendida de un cubreobjetos

1. Transiluminación de órganos exteriorizados:

• Consiste en observar "in situ", por transparencia, los órganos o finas membranas como el mesenterio de pequeños animales vivos, a través un microscopio.[pic 5]
• Útil en el estudio de la circulación.
  [pic 6]

1. Método de la cámara transparente:

• Métodos más útiles para estudiar material "in vivo".
• Son cámaras metálicas y de cristal o plástico que instaladas en las orejas de conejo (cámara de CLARK y CLARK) o en la piel del ratón (ALGIRE y LEGALLAIS) permiten observar, a pocos aumentos, la circulación en pequeños vasos.

1. Injertos blefoblásticos:

• La cámara anterior del ojo es una cámara transparente y natural.
• Pequeños fragmentos de tejidos, procedentes del mismo animal, pueden ser trasplantados y adquirir vascularización desde el ángulo corneoiridial.
• De esta manera, las células y tejidos así trasplantados, sumergidos en un líquido fisiológico (el humor acuoso), pueden ser observados con un microscopio a través de la córnea.

ESTUDIOS POST-MORTEM.

[pic 7]

FIJACIÓN.

Objetivo->[pic 8]

• Para evitar la digestión del tejido por enzimas presentes dentro de las células (autólisis) o por bacterias
• Para preservar la estructura y la composición molecular, las piezas de los órganos deben tratarse de manera rápida y adecuada después de la extracción del cuerpo del animal.
• La fijación, se puede realizar por métodos químicos o, con menos frecuencia, físicos.
• Para que una sustancia sea buen fijador:

1. Gran poder de penetración.
2. Qué actúe rápidamente precipitando el coloide celular, sin causar alteraciones morfológicas.
3. Deben presentar un pH generalmente ácido, ya que los fijadores alcalinos provocan alteraciones.
4. No deben entorpecer los métodos de inclusión, microtomía y coloración.

• Ejemplos:[pic 9][pic 10]

• Formaldehido
• Líquido fijador de Bouin

Deshidratación.

• Tejidos + H2O -> Deshidratación
• Se utiliza una serie graduada de baños de alcohol de baja (e.g. 50%) a alta concentración (100%) para retirar el H2O

Aclaramiento.

Comúnmente se utiliza xileno para transparentar el tejido y extraer el alcohol antes de la inclusión.[pic 11]

INCLUSIÓN.

• Los tejidos generalmente son incrustados en un medio sólido para facilitar su seccionamiento.[pic 12]
• Debe haber una verdadera impregnación a nivel celular.
• Los materiales más comunes en la inclusión son:
• parafina (microscopia óptica)
• resinas plásticas (microscopía óptica y electrónica)[pic 13]

MICROTOMÍA (CORTE).[pic 14]

• Micrótomo: Equipado por una hoja y un brazo que hace avanzar el bloque tisular en incrementos iguales específicos.
• Corte: 5-10 micras (µm)
• Montaje: Laminillas de vidrio

[pic 15]

TINCIÓN.

• Se efectúa principalmente con colorantes hidrosolubles.
• Tipos de tinciones:

• Distinguen los componentes ácidos y básicos de la célula
• Distinguen componentes fibrosos de la matriz extracelular
• Distinguen sales metálicas que se precipitan en tejidos.

• Los tintes tiñen los componentes del tejido de forma más o menos selectiva.

• La mayoría de estos colorantes se comportan como compuestos ácidos o básicos y tienen tendencia a formar enlaces electrostáticos con radicales ionizables de los tejidos.

[pic 16][pic 17]

• Los componentes tisulares que se tiñen más fácilmente con colorantes básicos se denominan basófilos (ADN, RNA, etc.);
• Los que tienen afinidad por los colorantes ácidos se denominan acidófilos (constituyentes citoplasmáticos).

MICROSCOPÍA.

• La microscopía se basa en la interacción de la luz y los componentes del tejido.
• Con el microscopio óptico, las preparaciones teñidas generalmente se examinan por medio de luz que atraviesa la muestra.
• El microscopio está compuesto de partes mecánicas y ópticas. Los componentes ópticos consisten en tres sistemas de lentes: condensador, objetivo y ocular.
• El aumento total se obtiene multiplicando el poder de aumento del objetivo y el ocular.

[pic 18]

PROCEDIMIENTOS AVANZADOS.

• Histoquímica y citoquímica: Localizar los constituyentes químicos específicos de los tejidos.

• Ejemplo: Ácido periódio de Schiff para detectar glucógeno y carbohidratos.

• Inmunocitoquímica: Se require el desarrollo de un anticuerpo contra la macromolécula específica que se localizará, y el anticuerpo será marcado por medio de fluorescencia.
• Microscopía electrónica: electromagnetos son los que enfocan el haz de electrones.[pic 19]

De transmisión: Cerca de 0.2nm (más de 1000 veces la resolución del microscopio de luz compuesto. [pic 20]

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