Medición de pH en las placas de agar
Alex Meneses Tutorial 6 de Mayo de 2025
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Mediciones de pH de placas de agar[pic 3]
Con InLab®Sensor de superficie Pro-ISM
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El uso del sensor de pH correcto junto con buenas prácticas de medición son factores clave para obtener una calidad constante del medio y cumplir con las regulaciones. Para las pruebas de pH, la USP 41 <1117> recomienda el uso de una sonda plana. El pH de cada lote de medio producido se confirma después de que se haya enfriado a temperatura ambiente (20-25 °C). Los medios comprados refrigerados deben calentarse a temperatura ambiente para la medición. El pH del medio debe estar en un rango de ± 0,2 del valor indicado por el fabricante, a menos que un método validado admita un rango más amplio.
La elección correcta del sensor: InLab Surface Pro-ISM[pic 5][pic 6]
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Gestión inteligente de sensores
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Eje robusto de polisulfona
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Cartucho de Ag/AgCl (Argenthal)
Lana de vidrio
Trampa de iones de plata
Ag+electrolito de referencia libre
Sonda de temperatura incorporada6[pic 10]
Membrana de vidrio de pH plana (LoT)1 2
Unión de anillo cerámico abierto3
Figura 1: InLab Surface Pro-ISM, infografía de características.
No. Desafío | Solución | Descripción | |
1 | Medición del pH de superficies sólidas pequeñas | Membrana de pH plana | Asegura que la unión esté en contacto con la muestra, lo cual es necesario para obtener una medición. |
2 | Potencial de unión líquida inestable | Membrana de vidrio LoT | Tiene una membrana de vidrio de baja resistencia, lo que hace que el sensor sea altamente sensible al pH. |
3 | Tiempo de respuesta más largo | Unión de anillo cerámico abierto | Garantiza una salida relativamente rápida de electrolito, reduciendo el retraso en la medición. |
4 | El eje del sensor es propenso a sufrir daños | Eje robusto de polisulfona | Garantiza una mejor resistencia química y mecánica. Facilita el manejo del sensor, mejorando su durabilidad. |
5 | La lixiviación de iones de plata del elemento de referencia (alambre de Ag) provoca lo siguiente:
| ARGENTINA™referencia sistema | El cartucho lleno de granulado de AgCl suministra los iones de plata para la reacción química en el cable conductor. La trampa de iones de plata detiene la reacción química de Ag.+Los iones se descargan en la solución electrolítica, lo que evita la precipitación y la contaminación de la unión. Por lo tanto, se obtienen lecturas estables en comparación con el sensor convencional con sistema de referencia Ag/AgCl. |
6 | Inconsistencias en los resultados causadas por variaciones de temperatura | Sonda de temperatura integrada (y funcionalidad ATC de los medidores de pH METTER TOLEDO) | El pH depende de la temperatura. Con la sonda de temperatura integrada, se registra la temperatura de la muestra. Durante la calibración, el valor de pH se compensa con los efectos de la temperatura para proporcionar una pendiente más precisa. |
7 | Manejo de datos seguro y sencillo | ISMO®(Gestión inteligente de sensores) | El sensor mantiene un registro de información importante, como los últimos datos de calibración, la exposición máxima a la temperatura del sensor y la información del sensor, lo que proporciona la máxima trazabilidad y seguridad de los datos. También ayuda en el reconocimiento automático del sensor al conectarse al medidor. |
Tabla 1: Características y ventajas de InLab Surface Pro-ISM.
Buenas prácticas de medición para obtener resultados consistentes y de alta calidad[pic 11]
Calibración
- Calibre el sistema periódicamente utilizando buffers MT, al menos una vez al día.[pic 12]
- Verifique la calibración midiendo un tampón de pH de
valor de pH conocido entre las calibraciones.
- Utilice al menos dos tampones de pH para la calibración que delimitan el pH de la muestra esperado, por ejemplo, utilice tampones de pH 4,01 y 7,00 para la calibración si se espera que el pH de la muestra sea 5,5.
- Una pendiente del 95-105% y un desfase de 0 mV ± 30 mV garantizan un buen estado del electrodo y, por lo tanto, mediciones confiables.
- Utilice siempre tampones de pH nuevos y de alta calidad y nunca los reutilice.
- Para obtener resultados precisos, los tampones de pH y las soluciones de muestra deben estar a la misma temperatura.
Medición
- Prepare las placas de agar según el protocolo correspondiente y verifique el pH después de la esterilización, ya que pueden ocurrir cambios en el pH. En el caso de medios adquiridos comercialmente, no es obligatorio.
- Coloque suavemente la punta del InLab Surface Pro-ISM sobre la superficie del medio de agar. Registre el pH utilizando el punto final automático.
Realizar mediciones de las muestras a la
temperatura requerida por triplicado.
- Después de cada medición, limpie a fondo el sensor de pH con agua desionizada. Utilice agua jabonosa suave o etanol si es necesario. En ese caso, enjuague nuevamente con agua desionizada para eliminar los restos del solvente.
- No frote la superficie del sensor; séquela siempre con un pañuelo de papel para eliminar el exceso de agua.
- No exponga el sensor a productos químicos ácidos o alcalinos agresivos. El rango de pH definido para InLab Surface Pro-ISM es de 1 a 11 unidades y, por lo tanto, cubre los requisitos de pH para medios de agar.
- Mantenimiento
- Reacondicione periódicamente el sensor con HCl 0,01 M según el rendimiento del sensor. La frecuencia del reacondicionamiento depende de la cantidad de muestras analizadas por día y de la antigüedad del sensor.
Los sensores antiguos requieren un acondicionamiento más frecuente en comparación con los sensores nuevos.
- Vuelva a calibrar el sensor después del reacondicionamiento.
D. Almacenamiento
- Entre mediciones o durante la noche, mantenga el sensor en la tapa humectante llena con solución de almacenamiento InLab.
Nunca guarde el sensor seco o en agua destilada, ya que esto afecta la membrana de vidrio sensible al pH y reduce su vida útil.[pic 13]
Figura 3: Medición utilizando InLab Surface Pro-ISM en una placa de agar de papa y dextrosa.
Resultados y discusión
Se midieron tres tipos diferentes de placas de agar utilizando el sensor de pH InLab Surface Pro-ISM, aplicando las buenas prácticas descritas en el capítulo anterior.
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