PRATICA DE DE BACTERIOLOGIA DE TERCER PARCIAL
Jose Francisco Ramirez LunaPráctica o problema13 de Febrero de 2018
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[pic 1] | CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO INDUSTRIAL Y DE SERVICIOS No. 65 Materia: bacteriología Profesor: Daniel Morales González
| Semestre: 3 Grupo: LCAV |
Bloque:3 Fecha de realización: 23/11/17 Fecha de entrega: 30/11/17
Reporte No. / Nombre: ________ urocultivo
________ coprocultivo
________ antibiograma
EVALUACIÓN.
CRITERIO | VALOR | OBSERVACIONES |
Calidad y organización del reporte. | ||
Obtención y procesamiento de datos | ||
Conclusión y evaluación. | ||
Fuentes bibliográficas y pies de figura. | ||
Trabajo en equipo. | ||
Cumplimiento de normas de sseguridad en el trabajo. | ||
Calificación final: | Σc / n = |
Nombre del alumno: José Francisco Ramírez Luna
Objetivo: aprender a hacer de manera correcta el urocultivo y el coprocultivo, posteriormente realizar las pruebas bioquímicas, de una manera correcta, usar el conocimiento adquirido para hacer el antibiograma.
Fundamento: Se utilizará, los conocimientos que se han adquirido, en las practica anteriores, para hacer una práctica ordenada y correcta.
Material y reactivos:
Coprocultivo:
Cajas de Petri caldo tetrationato
- Frasco esterilizado Agar emb
1 Balanza granataria
2 Probeta de 100 ml Agar sangre
5 Espátula reactivos para la
1 Parrilla eléctrica Tincion de gram
1 Matraz erlenmeyer de 500 ml
2 Matraz erlenmeyer de 250 ml
4 Tubos de ensaye de 10 x 75
1 Tubo de ensaye de 15 x 150
1 Autoclave
2 Mecheros
2 Asas bacteriológicas
1 Estufa bacteriológica
1 Tijeras
1 Gradilla
1 Bolsa para residuos sólidos infecto-contagiosos
Papel para envolver
Cinta testigo
Papel de aluminio
Algodón
Gasa
Hisopos esteriles
Urocultivo:
Cajas de petri Agar Cled
1 Frasco esterilizado Agua destilada
1 Balanza granataria
1 Probeta de 100 ml
1 Espátula
1 Parrilla eléctrica
1 Matraz erlenmeyer de 500 ml
Papel para envolver
Cinta testigo
1 Autoclave
2 Mecheros
2 Pipetas serológicas graduadas 1/100 y 1/1000
Previamente envueltas y esterilizadas
2 Triangulos de vidirio
1 Estufa bacteriológica
1 Cuentacolonias
1 Bolsa para residuos sólidos infecto-contagiosos
Localizacion de enterobacterias:
2 Asas bacteriológicas Sim
1 Tijeras Citrato de simmons
2 Mecheros Kligler ó kia
1 Estufa bacteriológica Fenilalanina
Hisopos esteriles Caldo de urea
1 Autoclave Reactivo de kovacks
1 Gradilla Cloruro férrico al 10%
1 Bolsa para residuos sólidos infecto-contagiosos
Antibiograma:
2 Mecheros 1 Caja de agar muller-hinton
2 Hisopo esteril
1 Estufa bacteriológica 1 Disco de antibióticos
1 Pinzas
1 Bolsa para residuos sólidos infecto-contagiosos
Procedimiento:
Coprocultivo:
- Preparar cajas de Petri con agar sangre, emb, salmonella–shigella, verde brillante, según las indicaciones del fabricante, así mismo los medios para las pruebas bioquímicas en los tubos de ensaye.
- Esterilizar frascos para la toma de muestra.
- Instruir al paciente sobre la forma que debe tomar la muestra.
- La muestra recibida se siembra en los medios de cultivo de la siguiente manera: se toma la muestra con un hisopo estéril y descarga la muestra en los medios sólidos en cajas de Petri y se siembra en caldo tetrationato.
- Etiquetar las cajas de Petri y el tubo de caldo tetrationato.
- Incubar en la estufa bacteriológica a 37 °c durante 24 ó 48 horas.
- Revisar las cajas y se hace una descripción de la morfología de las colonias bacterianas de cada caja de petri y se toma una muestra del caldo tetrationato y se resiembra en caja de verde brillante o salmonella - shigella.
- De la caja de agar sangre se escoge las colonias sospechosas y se hace un frotis que se tiñe con la técnica de Gram.
- Una vez seco los frotis, colocar una gota de aceite de inmersión y observar en el microscopio compuesto con el objetivo de inmersión teniendo cuidado de observar varios campos.
Urocultivo:
- Se preparan cajas de Petri con agar CLED según las indicaciones del fabricante.
- Esterilizar los frascos para la toma de muestra y pipetas serológicas.
- Instruir al paciente sobre la forma que debe tomar la muestra de orina.
- Sembrar en una caja con dilución 1 :10 y en otra 1:100 y se distribuye la muestra mediante el uso de un triángulo de vidrio.
- Etiquetar las cajas de Petri.
- Incubar en la estufa bacteriológica a 37ª c durante 24 ó 48 horas.
- Revisar las cajas y contar con la ayuda de la cuenta colonias. Realizar una descripción de la morfología de las colonias bacterianas.
- Preparar un frotis de cada colonia diferente, se fija y se tiñen con la técnica de Gram.
- Una vez seco, los frotis, se les coloca una gota de aceite de inmersión y se observan en el microscopio compuesto con el objetivo de inmersión teniendo cuidado de observar varios campos.
- Dibujar al menos un campo de cada frotis poniendo cuidado con el color observado, la forma y agrupación de las bacterias.
- Discute los resultados con los integrantes de tu equipo y hagan la identificación presuntiva de las bacterias aisladas.
Localización de enterobacterias:
- Se escoge de cada cultivo las colonias que son sospechosas de ser una bacteria patógena o en su defecto, escoger alguna bien aislada y sembrar en los medios para pruebas bioquímicas.
Antibiograma:
- Enciende los mecheros y en el espacio entre los dos escoge una colonia previamente identificada, tómala con un hisopo y por la técnica de estría cruzada siembra en la caja de agar muller-hinton, cuidando que quede sembrada toda la superficie de la caja.
- Esterilizar las pinzas y toma un multidisco o los sensidiscos que correspondan y colócalos sobre la superficie del agar. Etiqueta las cajas e incuba a 24º c durante 24 horas.
- Sacar las cajas de la estufa y revisar los resultados, midiendo los halos de inhibición y elaborando el reporte de resultados.
Resultado y observaciones:
Datos brutos
[pic 2][pic 3][pic 4]
Despues de sembrar, estos fueron los resultados de los agares CLED y el agar EMB.[pic 5][pic 6]
Asi crecieron las colonias en las resiembras del el cepario.
[pic 7][pic 8] Estas fueron las vistas en 100x, en una se puede presenciar que es Gram (-) y la otra Gram (+).
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