Tema del informe: “Hidrolisis del almidón por la amilasa salival”
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PRACTICO 2: ACTIVIDAD ENZIMATICA. AMILASA SALIVAL
Tema del informe: “Hidrolisis del almidón por la amilasa salival”
Fecha: 31-08-2015
INDICE
Introducción pág. 3
Materiales pág. 4
Método experimental pág. 5
Grafico pág. 6
Experimento n° 1 pág. 7
Cálculos de experimento n° 1 pág. 8
Resultados de experimento n° 1 pág. 8
Experimento n° 2 pág.9
Cálculos de experimento n° 2 pág. 10
Resultados de experimento n° 2 pág. 11
Discusión pág. 12
Conclusión pág. 13
Bibliografía pág. 14
Cuestionario pág.15
INTRODUCCION
El almidón es el polisacárido de reserva más abundante en los vegetales y es una fuente importante de azúcares para los animales dentro de los que se encuentra el hombre. La estructura química del almidón permite que al penetrar el yodo en ésta se forme una disolución de color azul violácea intensa característica que permite la identificación positiva del almidón en una disolución. El almidón puede romperse o hidrolizarse por medios químicos o enzimáticos.
La amilasa salival denominada también ptialina o tialina, es un enzima hidrolasa que tiene la función de digerir el glucógeno y el almidón para formar azúcares simples.
Los objetivos de este práctico son:
- Identificar la hidrolisis del almidón en solución de saliva humana.
- Aprender la función de la enzima amilasa.
- Comparar la experiencia con la teoría.
MATERIALES
- 1 gradilla
- 10 Tubos de ensayo
- 2 micropipetas (200 y 1000 µl)
- 3 vasos de precipitado (50 o 100 mL)
- Baño de hielo (0°C)
- Baño termo regulador (90°C)
- Estufa a 37°C
- Cubetas para espectrofotometría
- Espectrofotómetro
- SOLUCIONES Y REACTIVOS
- Solución de almidón al 2%
- Lugol
- Solución salina fisiológica (0,9%)
- Agua destilada
- Saliva humana
MÉTODO EXPERIMENTAL
- Dos voluntarias de nuestro equipo de trabajo juntaron 5 mL de saliva en un vaso de precipitado pequeño y la diluyeron con solución fisiológica hasta obtener 15 mL de “solución enzimática”.
- A cada tubo le fuimos colocando lo correspondiente según la siguiente tabla:
Tubo | Almidón 2% (µl) | Concentración % | Agua destilada | Absorbancia 590 nm |
I | 0 | 0,00 | 4500 | |
II | 250 | 0,10 | 4250 | |
III | 1250 | 0,50 | 3250 | |
IV | 2500 | 1,00 | 2000 | |
V | 3750 | 1,50 | 750 |
- Luego a cada tubo agregamos 500 µl de lugol y los completamos con 5 mL de agua destilada.
- Agitamos suavemente e hicimos las lecturas correspondientes de absorbancia obteniendo:
Tubo | Almidón 2% (µl) | Concentración % | Agua destilada | Absorbancia 590 nm |
I | 0 | 0,00 | 4500 | 0,1 |
II | 250 | 0,10 | 4250 | 0,026 |
III | 1250 | 0,50 | 3250 | 0,048 |
IV | 2500 | 1,00 | 2000 | 0,208 |
V | 3750 | 1,50 | 750 | 0,710 |
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