Extracion de los pigmentos del chile guajillo

METODOLOGIA:

EXTRACION DE LOS PIGMENTOS DEL CHILE GUAJILLO:

• se trituro finamente el chile guajillo quitándole las semillas.

• se agregó cloruro de metileno concentrado a 20g de chile guajillo.

• se dejó reposar varios días.

• se decantó para separar el chile guajillo del extracto.

PREPARACION DE LAS CAPAS FINAS POR INMERSION:

• se preparó la suspensión donde se agregó 30 g de silica gel en un frasco y cloruro de metileno se agito hasta quedar semejante al atole.

• Se limpiaron los portaobjetos con acetona y un algodón

• Se juntaron dos portaobjetos y se sumergieron en la suspensión y se sacaron rápidamente y se dejaron secar las placas. Así se hicieron con las placas sin olvidar que cada tres pares de placas se le agregó más silica gel y cloruro de metileno.

• En una charola de aluminio se colocaron las placas y se metieron a la estufa a 103̊ C durante aprox. 10 minutos. Pará activarlas

PUNTEO Y ELUCION DE DISOLVENTES DE DIFERENTE POLARIDAD

• Se prepararon los capilares con un encendedor

• Con las placas defectuosas se practicó el punteo con los capilares (extrayendo extracto con ellos) que se obtuvieron.

• Se seleccionaron los mejores capilares para el punteo de las placas activadas.

• Se prepararon las cámaras de elución colocando papel filtro y diferentes disolventes en cada cámara

• Se tapó el frasco para que este se llene de los gases de los disolventes

• Se punteo la placa donde se dejó aproximadamente 0.5 c.m entre punto y otro.

• Se metieron las placas en las cámaras y no se dejó alcanzar más aproximadamente 1 cm de la parte arriba de la placa.

• Se sacan las placas y se dejaron secar se marcó con capilar se marcó a que altura alcanzo.

• Se comprobó que resultados fueron los que hubo más coloreo donde se seleccionó dos disolventes.

MEZCLA DE DISOLVENTES

• Se jugó con las polaridades de los disolventes en proporciones (1-9, 8-2,

7-3, 6-4, 5-5, 4-6 ,3-7 ,2-8, 9,1) estos fueron hexano- acetato de etilo, acetona-hexano

• Se prepararon las placas

• Con pipetas graduadas se colocaron las proporciones indicadas en cada cámara.

• Se agito la mezcla y se colocó el papel filtro

• Se punteo las placas con el extrato y se colocaron dentro de las cámaras

• Se sacaron las placas antes de alcanzar el límite de esta y se dejaron secar

• Se trazó con un capilar la altura que este alcanzo

• La mezcla ideal se mostró donde hubo más coloreo esta se utilizó para la cromatografía en columna.

CROMATOGRAFIA EN COLUMNA

• Se montó el sistema con un soporte universal, unas pinzas, una bureta de 50.

• Se pesaron 15 g de silica gel para columna

• Se depositaron en un matraz bola de 100 ml y se agregó el disolvente menos polar de la mezcla el hexano.

• Se agito la mezcla pero se ve que se precipita de manera rápida.

• Se preparó la mezcla ideal en un frasco ámbar se colocó 70 ml de hexano y 30 ml de acetato de etilo.

• En la bureta se agregó el menos polar(hexano) para sacarle todo el aire

• Con alambre de más de 60 cm. De largo se coloca un algodón en forma de galletita en la bureta este actuó como filtro

• Se vertió el adsorbente con un embudo de tallo largo donde se agito rápidamente el matraz.

• Con una manguera se golpeó suavemente para que se asiente el absorbente.

• Con una pipeta graduada se limpia las partículas que quedaron en la bureta

• Se abrió la llave hasta que el absorbente quedo bien sedimentado

• Se colocó sal de mesa con ayuda de un embudo de tallo corto sobre el adsorbente

• Se colocó el disolvente menos polar (hexano) para evitar que se seque el absorbente.

• Se abrió la llave y con ayuda de una pipeta graduada se extraen un 1ml de extracto donde se verifico que no goteara y se limpió con algodón.

• Se metió dentro de la bureta y se puntea en diferentes partes de la bureta

• Se agregó la mezcla de disolventes para evitar que se seque el absorbente

• Se observó coloración roja-amarillenta se dejó que llegara hasta el algodón abriéndole a la llave

• a 20 tubos de ensayo se etiquetaron y se marcó cuanto es 1 ml y se colocó dentro de una gradilla

• Cuando el color alcanzo el algodón empieza la recolección de las fracciones cada 1ml los 20 tubos de ensayo

• Se cubrió cada tubo de ensayo con aluminio para con ellos hacer cromatografía en analítica en capa fina.

MATERIALES Y REACTIVOS PARA CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA

MATERIALES REACTIVOS

Portaobjetos Cloruro de metileno

Capilares Silica gel para capa fina

encendedor Chile guajillo

Frascos de vidrio Acetato de etilo

Papel filtro Hexano

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