Manual De Practica Uacj

OBJETIVO

Al término de esta práctica, el alumno deberá ser capaz de describir algunas de las técnicas de detección cualitativa de proteínas en base a los componentes de su estructura.

Determinar la presencia de proteínas en distintos alimentos mediante la reacción de Biuret y reacción xantoproteica.

INTRODUCCION

Las proteínas son macromoléculas formadas por cadenas lineales de aminoácidos unidos entre si por enlaces peptídicos, que intervienen en diversas funciones vitales como el metabolismo o la contracción muscular, el cual siempre involucran como ya conocemos el grupo amino (NH2) y el grupo carboxilo (COOH), las proteínas pueden clasificarse de acuerdo a diferentes criterios un ejemplo de ello son las proteínas simples formadas solamente por aminoácidos que forman cadenas peptídicas, las conjugadas formadas por aminoácidos y por un compuesto no péptido, la porción poli peptídica se denomina apoproteina y la parte no proteica se denomina grupo prostético.

Las proteínas son materiales que se desempeñan el mayor número de las funciones de las células de todos los seres vivos. Forman parte de su estructura básica de los tejidos y desempeñan funciones metabólicas y reguladoras también son seres vivos que definen la identidad de cada ser vivo, ya que son la base de la estructura del código genético ADN y de los sistemas de reconocimiento de organismos extraños en el sistema inmunológico.

Las proteínas son biomoléculas formadas por cadenas lineales de aminoácidos. El nombre proteína proviene de la palabra griega πρωτεῖος ("proteios"), que significa "primario" o del dios Proteo, por la cantidad de formas que pueden tomar.

Por sus propiedades físico-químicas, las proteínas se pueden clasificar en proteínas simples (holoproteidos), que por hidrólisis dan solo aminoácidos o sus derivados; proteínas conjugadas (heteroproteidos), que por hidrólisis dan aminoácidos acompañados de sustancias diversas, y proteínas derivadas, sustancias formadas por desnaturalización y desdoblamiento de las anteriores. Las proteínas son indispensables para la vida, sobre todo por su función plástica (constituyen el 80% del protoplasma deshidratado de toda célula), pero también por sus funciones biorreguladora (forma parte de las enzimas) y de defensa (los anticuerpos son proteínas).

Las proteínas desempeñan un papel fundamental para la vida y son las biomoléculas más versátiles y más diversas. Son imprescindibles para el crecimiento del organismo. Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, entre las que destacan:

Estructural. Esta es la función más importante de una proteína (Ej: colágeno),

Inmunológica (anticuerpos),

Enzimática (Ej. sacarasa y pepsina),

Contráctil (actina y miosina).

Homeostática: colaboran en el mantenimiento del pH (ya que actúan como un tampón químico),

Transducción de señales (Ej. rodopsina)

Protectora o defensiva (Ej. trombina y fibrinógeno)

Las proteínas están formadas por aminoácidos los cuales a su vez están formados por enlaces peptídicos para formar esfingocinas.

Las proteínas de todos los seres vivos están determinadas mayoritariamente por su genética (con excepción de algunos péptidos antimicrobianos de síntesis no ribosomal), es decir, la información genética determina en gran medida qué proteínas tiene una célula, un tejido y un organismo.

Las proteínas se sintetizan dependiendo de cómo se encuentren regulados los genes que las codifican. Por lo tanto, son susceptibles a señales o factores externos. El conjunto de las proteínas expresadas en una circunstancia determinada es denominado proteoma.

MATERIALES Y METODOS

Bata de laboratorio

Lapicero

Manual de prácticas

Guantes

Cubrebocas

Cuaderno de apuntes

Y además muestras para nuestros experimentos:

1.- 8 tubos de 20 x 150 mm

2.- 1 pipetas de 1.0 ml.

3.- 1 Gradilla

4.- Sol. de albúmina 0.1%

5.- Sol. de peptona 0.1%

6.- Sol Gelatina 0.1 %

7.- Sol. NaOH 10.0 %

8.- Sol. Sulfato de Cu 0.5 %

9.- Ac. nítrico concentrado

10.- Hidróxido de amonio

REACCION BIURET

Es una de las más utilizadas. Método general para la determinación de proteínas o péptidos. Se basa en la reacción de sulfato de cobre con un compuesto que tenga dos o más enlaces peptídicos, en un medio alcalino. El producto es un complejo color violeta cuya intensidad de color depende de la cantidad de enlaces peptídicos presentes.

La positividad se manifiesta por la aparición de un color violeta. Se utilizó cuatro tubos de ensayos colocados en una gradilla en el primer tubo se colocó con la pipeta, 1 ml de agua destilada, 2 ml de hidróxido de sodio y 0.5 ml de CuSO4, así como se muestra en la tabla I a cada tubo le agregamos diferentes reactivos.

Tubo 1 2 3 4 5

Agua destilada 1 mL -- -- -- --

Albúmina -- 1 mL -- -- --

Peptona -- -- 1 mL -- --

Gelatina -- -- -- 1 mL --

...