Informe Identificación de Carbohidratos

OBJETIVOS

1. Reconocer la presencia de carbohidratos en una muestra problema mediante la prueba de Molish.
2. Realizar ensayos cualitativos para el reconocimiento de carbohidratos específicos.

RESUMEN

En esta práctica se realizaron diferentes pruebas de identificación de carbohidratos, como también se probó su solubilidad en agua.

1. Para la prueba de solubilidad se depositó agua en tubos de ensayo con glucosa, sacarosa y almidón; obteniendo resultados positivos de solubilidad para todas las muestras a excepción del almidón que es poco soluble.
2. Para la prueba de identificación de Molish se colocó glucosa, leche y miel en tubos de ensayo diferentes, luego se añadió reactivo de Molish seguido de ácido sulfúrico a cada muestra. Dicha prueba dio positiva para las tres muestras formando un anillo color violeta en la parte inferior del tubo.
3. Prueba de Selliwanoff: en dos tubos diferentes se agregó una pequeña cantidad de fructosa y glucosa, luego se añadió el reactivo de Selliwanoff a cada muestra y se llevó a baño maría. La prueba fue positiva para la fructosa, dando una coloración rojiza a la solución.
4. Para realizar la prueba de tollens se agregó glucosa, sacarosa y fructosa en diferentes tubos, después de añadirle un poco del reactivo de tollens y llevarlo a baño maría se obtuvo que: la glucosa y la fructosa reaccionaron ambas al mismo tiempo formando un espejo de plata, en cambio la sacarosa tardó más tiempo en reaccionar formando también un espejo de plata.
5. En la prueba de Fehling se utilizó glucosa, fructosa y sacarosa como carbohidratos, a los cuales se les agregó un poco del reactivo de Fehling y se calentó en baño maría. Dicha prueba fue positiva para la glucosa y la fructosa.
6. En la prueba de Barfoed se utilizaron como muestra la sacarosa, glucosa, fructosa y almidón. Luego de agregarles el reactivo se llevaron a baño maría, dando como resultado positivo solamente para la glucosa y la fructosa presentando un precipitado de color rojizo.
7. Prueba para sacarosa: para esta prueba se agregó HCl a la sacarosa y se calentó, luego se agregó NaOH y se dividió la solución en dos partes y se realizaron pruebas de Salliwanoff y Fehling por separado. Dando negativo para la prueba de Salliwanoff y positivo para Fehling presentando una coloración café-rojiza con un precipitado café.
8. Para la prueba de polisacáridos se mezcló una solución de almidón con yodo dando una coloración azul oscuro indicando que dicha prueba fue positiva.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL Y RESULTADOS

1. Prueba de solubilidad en agua.

1. En tres tubos de ensayo limpios se colocó una pequeña cantidad de carbohidratos: glucosa, sacarosa y almidón.[pic 1]
2. Se añadieron 2 ml de agua a cada tubo y se agitó.

Resultado: al agitar los tubos de ensayo se observó que todas las muestras son solubles en agua, a excepción del almidón que es poco soluble.

PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN

1. Prueba de Molish.

1. Se colocó 1 ml de tres muestras: glucosa, leche y miel en tubos de ensayo (cada muestra en tubos diferentes).[pic 2]
2. Se agregaron 5 gotas del reactivo de Molish a cada muestra.
3. Se añadió cuidadosamente por las paredes del tubo 1 ml de ácido sulfúrico concentrado hasta formar dos capas y se observó.

Resultado: dio positiva para las tres muestras formando un anillo color violeta en la parte inferior del tubo.

1. Prueba de Selliwanoff.[pic 3]

1. En un tubo de ensayo se adicionó 0.5 ml de solución de fructosa y en un segundo tubo se adicionó 0.5 ml de solución de glucosa.
2. Se adicionó 1 ml del reactivo de Selliwanoff a cada tubo.
3. Se calentó por 1 minuto en un baño de agua hirviendo.

Resultado: la prueba dio positiva únicamente para la fructosa, presentando una coloración rojiza.

1. Prueba de Tollens.

1. Se agregó glucosa, fructosa y sacarosa en diferentes tubos.[pic 4]
2. Después se añadieron 2 goteros del reactivo de tollens a cada tubo.
3. Por último, se llevó a baño maría.

Resultado: se obtuvo que la glucosa y la fructosa reaccionaron ambas al mismo tiempo formando un espejo de plata, en cambio la sacarosa tardó más tiempo en reaccionar formando también un espejo de plata.

1. Prueba de Fehling.

1. Se tomaron tres tubos de ensayo y se enumeraron del 1 al 3.
2. Se agregó 1 ml de las siguientes soluciones: solución de glucosa al 2% al tubo 1; 1ml de solución de fructosa al 2% al tubo 2 y 1 ml de solución de sacarosa al 2% al tubo 3.
3. Se agregó 0.5 ml del reactivo de Fehling A y 0.5 ml de reactivo de Fehling B a cada uno de los tubos.
4.  Se colocaron los tres tubos al mismo tiempo en un baño maría.

Resultado: la glucosa y la fructosa reaccionaron rápido observándose en ambas una oxidación, dando la formación de un precipitado color rojo ladrillo. En cambio, la sacarosa fue una reacción lenta, se fue oxidando poco a poco hasta formar una solución color naranja.

[pic 5]     [pic 6]

1. Prueba de Barfoed.

1. En 4 tubos de ensayo se adicionó: al primero 0.5 ml de solución de sacarosa, al segundo 0.5 ml de solución de glucosa, al tercero 0.5 ml de solución de fructosa y al cuarto 0.5 ml de solución de almidón.
2. Se agregó 1 ml del reactivo de Barfoed a cada tubo.
3. Se calentó en baño maría por 2 minutos y se dejó reposar.

Resultado: la glucosa y la fructosa fueron pruebas positivas por la formación de un precipitado de color rojo ladrillo indicando la presencia de monosacáridos. Con la sacarosa se observó la formación leve de un precipitado rojo; por otra parte, con el almidón no hubo reacción.

[pic 7]     [pic 8]

1. Prueba para Sacarosa.

1. A 2.5 ml de una solución de sacarosa se agregaron 3 gotas de HCl concentrado.
2. Se calentó durante 5 minutos en un baño de agua hirviendo.
3. Se enfrió y se agregó NaOH 1M hasta neutralizar la solución.
4. Se dividió la solución en dos partes y se realizaron por separado las pruebas de Fehling y Salliwanoff.

Resultado: Prueba de Fehling: al agregar el Fehling a la solución se formó un precipitado muy colorido; luego del calentamiento la solución se puso color café-rojizo con un precipitado café.

Prueba de Selliwanoff: al agregar el reactivo de Salliwanoff a la solución, esta se puso incolora y después de su calentamiento adquirió una coloración naranja.

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1. Prueba para Polisacáridos.

[pic 13]

1. A 1 ml de solución de almidón se añadieron unas gotas de solución de yodo.

Resultado: se observó la producción de un color azul oscuro en la solución.

ANÁLISIS DE RESULTADOS

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