AISLAMIENTO DE HONGOS PATÓGENOS EN LA POST-COSECHA DEL FRUTO DE BOROJO (Borojoa patinoi)

 AISLAMIENTO DE HONGOS PATÓGENOS EN LA POST-COSECHA DEL FRUTO DE BOROJO (Borojoa patinoi)

DOCENTE

DONALD HEBERTH RIASCOS ORTIZ.

INTEGRANTE

VIVIAN SORANYI ANGULO RIASCOS

UNIVERSIDAD DEL PACIFICO

AGRONOMÍA.

FITOPATOLOGÍA

BUENAVENTURA VALLE 2017

INTRODUCCIÓN

El Borojo (Borojoa patinoi) es una baya carnosa que se cultiva en suelos francos arenosos profundos, es de color verde al principio y pardo al madurar, la pulpa es pastosa con un sabor agridulce y aroma agradable. (Ochoa y Hernández, 2007)

Debido a que esta fruta es no climatérica, se colecta del suelo, después de la caída natural cuando ha completado su desarrollo; la cascara es susceptible a la invasión o ataque del penicillium (Gallo, 1997)

Taxonomía

Reino: Fungí, Subdivisión: Deuteromicotina, Clase: Hyphomycete, Orden: Hyphales (moniliales), Familia: Moniliaceae Género: penicillium (Barnett, 1988)

Los hongos patógenos de plantas son importantes agentes causales de enfermedades en diferentes cultivos de importancia agronómica, en los que muchas veces son limitantes de la producción agrícola. Para efecto del manejo de estas enfermedades, es necesario realizar un diagnóstico confiable que lleve a la identificación taxonómica de los agentes de enfermedades.

El Penicillium es un género grande que puede encontrarse casi por todas partes, siendo el género de hongos más abundante en suelos.

La fácil proliferación de los Penicillium en los alimentos es un problema.

Algunas especies producen toxinas, sin embargo muchas especies de Penicillium son beneficiosas para los seres humanos.

Los quesos tales como el roquefort, brie, camembert, stilton, etc., se crean a partir de la acción de diferentes especies de Penicillium sobre la leche, y son absolutamente seguros de comer.

El antibiótico penicilina es producida por el hongo Penicillium chrysogenum, un moho ambiental.

OBJETIVO

General

• Realizar el aislamiento de hongos asociados al fruto de Borojo (Borojoa patinoi) en Pos- cosecha con síntomas de enfermedad.

Específicos

•  Identificar el género del hongo asociado a esta enfermedad.
• Inocular Penicillium en Borojo verde para comprobar la virulencia del patógeno.
• Realizar improntas para demostrar la infección ocasionada en los frutos verdes.

METODOLOGÍA

• Con ayuda de un estereoscopio se realizó la caracterización de los síntomas de enfermedad en las muestras colectadas. Se realizaron improntas para observar al microscopio de luz la presencia o no de microorganismos asociados a la muestra.
• Se Fraccionó la muestra en secciones de 25mm2 (5 mm * 5 mm; aproximadamente), tomando tejido enfermo y sano.
• Se Tomaron los cortes y se envolvieron en dos capas de gasa.
• En cabina de flujo laminar se realizó la desinfección superficial de los cortes por el siguiente procedimiento:

• Se suspendió la gasa con los cortes en etanol a 70% durante 1 minuto.
• Se realizaron 3 lavados con agua destilada estéril.
• Nuevamente se suspendió la gasa con los cortes en hipoclorito de sodio al 2% durante 1 minuto.
• Igualmente se realizaron  tres lavados con agua destilada estéril.

• Se Colocó la gasa con los cortes sobre una toalla de papel estéril para remover excesos de agua
• Con ayuda de una pinza estéril se removieron los cortes a una caja Petri con medio de cultivo PDA.
• Se pusieron las cajas Petri con los explantes en incubación en una cava de hicopor por 8 días, tiempo en el cual debe recuperar el cultivo puro las colonias de hongos crecidos.

RESULTADOS

FRUTO MACROSCÓPICAMENTE                     HIFAS   MICROSCÓPICAMENTE

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Como se observa en la imagen los síntomas y signos de la enfermedad son: aparición de moho en los tejidos del fruto, especialmente sobre la corteza, pierden su consistencia, se reblandece y adquieren previamente a su aparición un aspecto húmedo debido a que las hifas del hongo excretan una enzima que deshace la lignina de la corteza. (PITT, JI 1997) (COMERIO, R. 2000).

Color: lesiones de color verde en el centro y color blanco alrededor de las Elevación: plana.

CONIDIÓFOROS DE PENICILLIUM

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AISLAMIENTO DEL HONGO

CULTIVO PURO MACROSCOPICAMENTE

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HONGO ESPURULADO COLOR VERDE

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CULTIVO PURO MICROSCOPICAMENTE

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INOCULACIÓN

Se realizó la desinfección superficial de órganos sanos por inmersión en etanol al 70% por 1 minuto, hipoclorito de sodio al 1% por 1 minuto y agua destilada estéril (3 lavados).

De un hongo crecido en cultivo puro se tomaron trozos del micelio.

Inmediatamente realizados los cortes se procedió a realizar el primer inoculo poniendo los trozos del micelio encima de la corteza de un Borojo verde , posteriormente se realizó el mismo proceso con otro Borojo verde pero con heridas superficiales que se le ocasionaron con una cuchilla.

Finalmente, se incubaron los montajes en contenedores de transparente para una mejor observación de síntomas.

 Se está realizando el seguimiento de la sintomatología y se registró los periodos de incubación y de latencia.

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DISCUSION DE RESULTADOS

Una vez obtenido el fruto se procedió a observar la sintomatología de la enfermedad en el cual se observó color, la elevación, forma y signos de acuerdo a estos aspectos se dedujo que era un hongo por las características que presentaban dichas lesiones.

Se tomaron improntas del tejido afectado en el fruto; las cuales se observaron en el microscopio y se pudo constatar la presencia de estructuras correspondiente a un hongo inferior (Conidióforos) lo que nos confirma que la enfermedad la causaba un hongo.

Posterior a las improntas del tejido afectado se realizaron aislamiento del hongo en PDA y se revisó a los 6 días donde se observó el crecimiento del micelio el cual presento un color blanco, se tomó una muestra para analizar las estructuras allí presentes; donde solo se observaron hifas, tres días después el hongo presento una coloración verde menta, a las cuales se les realizo el anterior procedimiento donde confirmo que son las mismas estructuras presentes en el fruto afectado.  

Según los resultados obtenidos la pudrición es causada por Penicillium, al principio tiene un aspecto de manchas blandas, aguanosas, ligeramente decoloradas y de tamaño variable las cuales pueden aparecer en cualquier parte del fruto. Estas manchas son superficiales al principio, pero se hunden con rapidez y a temperatura ambiente, gran parte del fruto o todo él se descompone en tan solo unos cuantos días. Poco después que se desarrolla la pudrición un moho blanco comienza a crecer sobre la superficie de la cascara. Posteriormente el hongo prosigue su desarrollo y produce esporas, el área esporulante tiene un color verde mente y a menudo se encuentra rodeada por una banda amplia de micelio blanco. El fruto de Borojo se caracteriza por su   delicado  y  suculenta superficie y   la gran cantidad de agua que contiene es más susceptible a daños e infecciones por hongos de este género. (Agrios, G.N 2005).

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